慢乙肝使用現有療法即使延長治療週期，臨床治癒仍然較為困難。核心蛋白抑制劑(CPIs)代表著一類新型的直接作用抗病毒藥物，可靶向病毒生命週期的多個步驟。Assembly Biosciences 公司的研究人員表徵了一種最近發現的核心蛋白抑制劑，該核心蛋白抑制劑在阻斷 cccDNA 的合成上具有增強的潛力。

研究人員使用誘導的 HepAD38 細胞系（Gt D），感染的 HepG2-NTCP 細胞和原代人肝細胞（PHH）來確定藥物的抗病毒活性。使用瞬時轉染測定法或HBV穩定細胞系建立泛基因型活性。使用 HepAD38 細胞中的一系列抑制濃度進行聯合研究。

使用引物和對HBV核心基因特異的探針，通過Taqman PCR（qPCR）定量HBV DNA。通過 ELISA 定量 HBeAg 和 HBsAg。 如前所述，分別通過 RT-qPCR，Northern 印跡或b-DNA，蛋白印跡，酶免疫測定（EIA）和 Southern 印跡檢測 HBV 總 RNA /衣殼化的pgRNA，衣殼和衣殼相關的核心DNA。

研究結果

ABI-H3733 表現出對 HepAD38 細胞和PHH（分別為EC50 5和12 nM）中病毒DNA複製有效抑制，並使得感染的 HepG2-NTCP 細胞和 PHH 中 的HBeAg，HBsAg 和 pgRNA降低（分別為EC50 43和61 nM）。

ABI-H3733 的抗病毒活性是泛基因型的，並且針對一組已知的CPI抗性變體保留了活性。未觀察到針對其他病毒（EC50>10μM）或細胞毒性測定（CC50>10μM）的顯著活性。

聯合研究預測當與Nuc療法聯合用藥時對病毒具有協同抑制作用。

ABI-H3733具有良好的物理性質，較低的藥物相互作用潛力和多種物種中有利的PK譜。

作用機制研究表明，阻斷 pgRNA 的衣殼化和破壞預先形成的衣殼（EC50 133 nM）的效力增強，導致在感染期間將含有rcDNA的衣殼運輸到細胞核期間過早解體。 使用Southern 印跡分析，ABI-H3733 抑制 cccDNA 形成，EC50為125nM。

綜上，研究人員認為，ABI-H3733 是一種新型核心蛋白抑制劑(CPIs)，衍生自新的化學骨架。它對HBV感染週期中的多個步驟具有有效的抑制活性，特別是與cccDNA形成相關的那些步驟。增強的效力和有利的臨床前概況支持將下一代CPI推進到臨床開發中

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