miR-132-3p過表達對MC3T3-E1細胞增殖分化的影響

摘要:

miR-132-3p過表達對MC3T3-E1細胞增殖分化的影響


文題釋義:

miRNA:是一類小的非編碼RNA,長度約為22個核苷酸,其主要通過結合靶標mRNA的3'UTR區誘導靶標mRNA降解或抑制其翻譯,從而在轉錄及轉錄後水平調控相關基因的表達。miRNA在細胞增殖、分化及凋亡等多種生物學活動過程中起著非常重要的調控作用,並且發現它是調控骨組織細胞增殖和分化過程的重要因子之一。

MC3T3-E1細胞:是新生C57BL/6小鼠顱頂骨中分離培養所建立的一株成骨細胞株,它能夠展現骨組織中成骨細胞的各個發育階段和各種生物學特性。作為研究成骨細胞增殖和分化的理想模型,被廣泛應用於國內外各種骨組織工程學研究。

背景:機械牽引力能夠影響MC3T3-E1細胞的增殖分化過程,並引起細胞內miR-132-3p的差異表達。然而,牽引力是否通過調控miR-132-3p的表達來影響成骨細胞增殖分化仍需進一步研究。

目的:

明確12%牽引力作用下MC3T3-E1細胞中成骨分化標誌因子及miR-132-3p表達變化,並進一步探討miR-132-3p對細胞增殖分化的影響。

方法:MC3T3-E1細胞分別加載0%,12%牽張應力,檢測應力加載後鹼性磷酸酶活性、骨鈣蛋白及miR-132-3p mRNA的表達水平;細胞內瞬時轉染miR-132-3p模擬物及其陰性對照,qRT-PCR檢測轉染後鹼性磷酸酶、骨鈣蛋白、Runt標誌轉錄因子2 mRNA的表達,CCK-8法檢測miR-132-3p對細胞增殖能力的影響。

結果與結論:①12%牽張應力作用下,MC3T3-E1細胞中鹼性磷酸酶活性、骨鈣蛋白mRNA表達水平下調(P < 0.01),miR-132-3p表達水平顯著升高(P < 0.05);②細胞內轉染miR-132-3p後,miR-132-3p模擬物組成骨分化標誌因子鹼性磷酸酶、骨鈣蛋白、Runt標誌轉錄因子2 mRNA表達水平顯著降低(P < 0.05);③相比於陰性對照組,miR-132-3p 模擬物轉染24,48,72 h後細胞增殖能力明顯降低(P < 0.001),且在轉染48 h後降低最明顯;④結果說明12%週期性循環牽張應力能夠通過過表達miR-132-3p負向調節MC3T3-E1細胞的增殖和成骨分化。

ORCID: 0000-0003-0696-3329(孫芬)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:幹細胞;骨髓幹細胞;造血幹細胞;脂肪幹細胞;腫瘤幹細胞;胚胎幹細胞;臍帶臍血幹細胞;幹細胞誘導;幹細胞分化;組織工程

關鍵詞: 機械牽引力, miR-132-3p, MC3T3-E1細胞, 細胞分化, 鹼性磷酸酶, 骨鈣蛋白, 細胞增殖, 國家自然科學基金

文章來源:孫 芬, 劉名燕, 劉 銘, 孫心旖, 馮雲霞. miR-132-3p過表達對MC3T3-E1細胞增殖分化的影響[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(1): 59-64.


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