這個指標,會導致乙肝表面抗原假陽性

病例資料

患者女,17歲。因系統性紅斑狼瘡復發,出現發熱、面部紅斑,伴全身肌肉、關節痠痛不適入院。

實驗室檢查:WBC 6.38×109/L,RBC 5.628×1012/L,Hb 107g/L,PLT 350×109/L,ESR 42mm/h,尿蛋白(++),抗核抗體7.9,雙鏈DNA抗體陽性,IgA 3.67g/L,IgM 1.51g/L,C3 0.428g/L,C4 0.142g/L,RF 290 IU/mL,ASO 29.4 IU/ml,CRP 1.83mg/L。

乙肝兩對半定性結果僅HBsAg表達陽性(S/CO值6.195),經複查結果仍為陽性。使用膠體金試紙條測試,結果卻為陰性。

這個指標,會導致乙肝表面抗原假陽性

診斷經過

由於兩種方法檢測結果不一致,於是決定用雅培Abbott AXSYM全自動化學發光儀進行乙肝兩對半定量檢測。結果顯示:HBsAg 0.04IU/mL(參考範圍<0.05IU/mL),其餘四項皆為陰性。HBV-DNA定量結果<5×102copies/mL。

酶聯免疫法檢測HBsAg的最低檢出限為0.5ng/ml,金標法檢測HBsAg的最低檢出限為1.0ng/mL,化學發光法檢測HBsAg的最低檢出限為0.1ng/mL。所以酶聯免疫法檢測結果為陽性時,比它靈敏度低的金標法和比它靈敏度高的化學發光法檢測結果均為陰性,因此判斷該患者的表面抗原在定性檢測中為假陽性結果。

患者由於系統性紅斑狼瘡復發,疾病處於活動期,累及多關節病變,導致血液中含有高濃度的類風溼因子高達290.0IU/mL(參考範圍0~30IU/mL),而酶聯法檢測表面抗原出現假陽性,且S/CO比值為6.195,可能由於RF干擾造成該標本出現假陽性錯誤結果。由於驗證檢測利用化學發光免疫測定技術,該反應體系可避免類風溼因子對其干擾作用,且儀器保持良好在控狀態,可排除儀器和試劑影響。

這個指標,會導致乙肝表面抗原假陽性

為什麼RF會導致HBsAg假陽性?

類風溼因子是機體針對體內因各種原因所產生的變異性IgG而產生的抗體,屬於IgM型,可存在於健康人群及類風溼患者和非類風溼患者(結核、肝炎、麻風等)人群中。它可結合於人抗HBsAg-IgG的Fc端,形成免疫複合物,從而導致乙肝表面抗原假陽性。

實驗室遇到這種情況如何處理?

鑑於ELISA法測定HBsAg存在RF這種非特異干擾因素,能夠導致檢測結果出現假陽性,臨床上處理有類風溼因子升高的患者在用酶聯免疫法檢測HBsAg時,建議對ELISA測定HBsAg出現陽性結果的標本,用金標法進行再次驗證。

2種方法結果相符均為陽性時,再報出結果。如2種方法結果不符時,需參考一下化學發光法的結果。對於很難判斷是否真正陽性時,應做HBV-DNA檢測或用中和實驗確認。

影響ELISA檢測的其他因素

ELISA法由於其檢測方法的高特異性及靈敏性,被廣泛應用於乙肝兩對半的檢測當中,但其檢測仍存在許多影響因素,使得結果難以分辨是否是假陽性。

這個指標,會導致乙肝表面抗原假陽性

(1)試劑盒對檢測結果的影響

ELISA方法檢測乙肝兩對半中,試劑盒質量是保證實驗結果準確性的基礎,但商家試劑盒的特異性、靈敏度、穩定性和精度等,往往存在一定差異。

(2)操作技術影響

試管的重複應用很容易造成交叉汙染,產生假陽性結果。ELISA法屬於精度測試實驗,吸液與加樣標準和吸嘴清潔將直接影響測試結果。

(3)檢測結果讀取的影響

測試結果判斷通常是在終止液添加後10分鐘內完成,否則容易出現洞結晶現象,從而影響酶標準儀器進行測試。

(4)干擾物質影響

有研究表明大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果,常見的有:類風溼因子、高濃度的AFP(如孕婦)、補體、交叉反應物質等。

<code>參考文獻:
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