这个指标,会导致乙肝表面抗原假阳性

病例资料

患者女,17岁。因系统性红斑狼疮复发,出现发热、面部红斑,伴全身肌肉、关节酸痛不适入院。

实验室检查:WBC 6.38×109/L,RBC 5.628×1012/L,Hb 107g/L,PLT 350×109/L,ESR 42mm/h,尿蛋白(++),抗核抗体7.9,双链DNA抗体阳性,IgA 3.67g/L,IgM 1.51g/L,C3 0.428g/L,C4 0.142g/L,RF 290 IU/mL,ASO 29.4 IU/ml,CRP 1.83mg/L。

乙肝两对半定性结果仅HBsAg表达阳性(S/CO值6.195),经复查结果仍为阳性。使用胶体金试纸条测试,结果却为阴性。

这个指标,会导致乙肝表面抗原假阳性

诊断经过

由于两种方法检测结果不一致,于是决定用雅培Abbott AXSYM全自动化学发光仪进行乙肝两对半定量检测。结果显示:HBsAg 0.04IU/mL(参考范围<0.05IU/mL),其余四项皆为阴性。HBV-DNA定量结果<5×102copies/mL。

酶联免疫法检测HBsAg的最低检出限为0.5ng/ml,金标法检测HBsAg的最低检出限为1.0ng/mL,化学发光法检测HBsAg的最低检出限为0.1ng/mL。所以酶联免疫法检测结果为阳性时,比它灵敏度低的金标法和比它灵敏度高的化学发光法检测结果均为阴性,因此判断该患者的表面抗原在定性检测中为假阳性结果。

患者由于系统性红斑狼疮复发,疾病处于活动期,累及多关节病变,导致血液中含有高浓度的类风湿因子高达290.0IU/mL(参考范围0~30IU/mL),而酶联法检测表面抗原出现假阳性,且S/CO比值为6.195,可能由于RF干扰造成该标本出现假阳性错误结果。由于验证检测利用化学发光免疫测定技术,该反应体系可避免类风湿因子对其干扰作用,且仪器保持良好在控状态,可排除仪器和试剂影响。

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为什么RF会导致HBsAg假阳性?

类风湿因子是机体针对体内因各种原因所产生的变异性IgG而产生的抗体,属于IgM型,可存在于健康人群及类风湿患者和非类风湿患者(结核、肝炎、麻风等)人群中。它可结合于人抗HBsAg-IgG的Fc端,形成免疫复合物,从而导致乙肝表面抗原假阳性。

实验室遇到这种情况如何处理?

鉴于ELISA法测定HBsAg存在RF这种非特异干扰因素,能够导致检测结果出现假阳性,临床上处理有类风湿因子升高的患者在用酶联免疫法检测HBsAg时,建议对ELISA测定HBsAg出现阳性结果的标本,用金标法进行再次验证。

2种方法结果相符均为阳性时,再报出结果。如2种方法结果不符时,需参考一下化学发光法的结果。对于很难判断是否真正阳性时,应做HBV-DNA检测或用中和实验确认。

影响ELISA检测的其他因素

ELISA法由于其检测方法的高特异性及灵敏性,被广泛应用于乙肝两对半的检测当中,但其检测仍存在许多影响因素,使得结果难以分辨是否是假阳性。

这个指标,会导致乙肝表面抗原假阳性

(1)试剂盒对检测结果的影响

ELISA方法检测乙肝两对半中,试剂盒质量是保证实验结果准确性的基础,但商家试剂盒的特异性、灵敏度、稳定性和精度等,往往存在一定差异。

(2)操作技术影响

试管的重复应用很容易造成交叉污染,产生假阳性结果。ELISA法属于精度测试实验,吸液与加样标准和吸嘴清洁将直接影响测试结果。

(3)检测结果读取的影响

测试结果判断通常是在终止液添加后10分钟内完成,否则容易出现洞结晶现象,从而影响酶标准仪器进行测试。

(4)干扰物质影响

有研究表明大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果,常见的有:类风湿因子、高浓度的AFP(如孕妇)、补体、交叉反应物质等。

<code>参考文献:
[1]陈金图,ELISA检测乙肝两对半的影响因素[J].检验与诊断,2014,8(21):64.
[2]许育兵,李薇,张卫云.类风湿因子影响乙肝表面抗原测定结果1例[J].广东医学,2010,31(5):662.
[3]迟婉利,孔祥明.ELISA检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因分析[J].中国误诊学杂志,2011,11(9):2050.
[4]任美英,王鹏.ELISA法与PCR法检测乙型肝炎病毒标志物的实验研究[J].现代检验医学杂志,2007,6(1):257./<code>


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