葡萄籽原花青素拮抗激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的作用

葡萄籽原花青素拮抗激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的作用


文题释义:

原花青素:广泛存在于蔓蓦、松树皮、越桔、绿茶等植物中,特别是葡萄籽中含有大量的原花青素。自从1961年德国科学家KARL首次在葡萄籽中分离出了2种多酚化合物开始,很多学者对各种花青素进行了广泛深入的研究。大量实验数据证实原花青素具有强力的抗氧化、减少细胞酶抑制以及血管保护等活性,体外实验显示葡萄籽原花青素提取物还具有较强的抗细胞凋亡作用。

含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase):是一类蛋白酶家族,成员较多,在人类已经鉴定了11种不同的Caspase,根据其蛋白酶序列的同源性可分为3个亚族:Caspase-1亚族包括 Caspase-1、4、5、11;Caspase-2亚族包括Caspase-2、9;Caspase-3亚族包括Caspase-3、6、7、8、10。


背景:激素性股骨头缺血坏死具有复杂的生物学过程,其发病机制至今未明,临床上缺乏行之有效的治疗手段。因此,探明激素性股骨头缺血坏死的病因学机制,仍然是该领域研究的重要内容。

目的:观察葡萄籽原花青素提取物对激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的影响。

方法:日本大耳白兔27只,随机分为3组:模型组静脉注射大肠杆菌内毒素,共2次,每次100 μg/kg,间隔24 h,在第2次注射完成后随即肌肉注射甲基强的松龙20 mg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;治疗组进行相同造模,在甲基强的松龙注射同时肌肉注射葡萄籽原花青素提取物200 μg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;对照组采用相同剂量注射生理盐水;最后一次注射后第4周空气栓塞法处死动物,取双侧股骨头常规固定脱钙、包埋,切片、苏木精-伊红染色,光镜下计数空缺骨陷窝,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察股骨头组织Caspase-9、Bcl-2的表达。

结果与结论:①模型组空缺骨陷窝率显著高于对照组(P < 0.01);治疗组空缺骨陷窝率显著低于模型组(P < 0.05),但仍高于对照组(P < 0.01);②对照组股骨头组织凋亡细胞较少;模型组股骨头组织中存在大量凋亡细胞,细胞核呈致密浓染;治疗组中凋亡细胞数有所减少,但仍高于对照组水平;③模型组Caspase-9的平均吸光度显著高于对照组(P

< 0.01),治疗组Caspase-9的平均吸光度显著低于模型组(P < 0.01),与对照组相比无显著差异;模型组Bcl-2的平均吸光度值显著低于对照组(P < 0.05),治疗组Bcl-2的平均吸光度显著高于模型组(P < 0.01);④结果表明,骨细胞凋亡参与了激素性股骨头坏死的发生发展,葡萄籽原花青素可能通过促进Bcl-2的表达和抑制Caspase-9的表达来减少骨细胞凋亡的发生。

ORCID: 0000-0002-5431-8717(张志峰)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

关键词: 糖皮质激素, 股骨头坏死, 细胞凋亡, 葡萄籽原花青素, Caspase-9, Bcl-2

文章来源:张志峰, 魏 晶, 孙 韬, 宋津玲, 赵振群, 黄 健. 葡萄籽原花青素拮抗激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的作用[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(26): 4146-4151.


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