新冠血清檢測單igg存在假陽性嗎?

于越


目前,臨床使用的抗體檢測方法主要有酶聯免疫法、化學發光法以及膠體金法。酶聯免疫法和化學發光法都可以進行定量檢測,是抗體檢測的主要方法。膠體金法則是一種即時檢測(point- of-care testing,POCT)方法,具有快速出具結果、檢測場地不受限制以及對操作者要求低的優點。但是,膠體金法只能進行定性檢測,作為POCT檢測方法,主要目的是快速且相對準確地檢驗。因此,對比抗體的定量檢測方法,靈敏度和特異度相對欠佳。

新冠核酸檢測陰性的患者

若IgM、IgG抗體檢測均陰性,提示無感染者或感染潛伏期,需詢問接觸史;

若IgM抗體檢測陽性,IgG抗體檢測陰性,提示存在干擾致結果假陽性或感染急性期,核酸結果假陰性,需結合胸部CT診斷;

若IgM抗體檢測弱陽性,IgG抗體檢測陰性,提示干擾致結果假陽性或初次感染病毒載量極低並處於早期,結合胸部CT診斷;

若IgM抗體檢測陰性,IgG抗體檢測陽性,提示既往感染,病毒已清除,處於恢復期或已康復,IgG可在體內長期存在,結合胸部CT排除;

若IgM、IgG抗體檢測均陽性,提示近期感染,核酸結果假陰性,結合胸部CT診斷或提示處於恢復期,IgM尚未消失。

新冠核酸檢測陽性的患者

若IgM、IgG抗體檢測均陰性,提示感染“窗口期”,體內尚未產生抗體,或免疫抑制劑治療、免疫缺陷性疾病導致不產生抗體;

若IgM抗體檢測陽性,IgG抗體檢測陰性,提示感染早期,IgM可以在症狀發生3~5天后產生;

若IgM抗體檢測陰性,IgG抗體檢測陽性,提示感染中晚期且病毒尚未清除;

若IgM、IgG抗體檢測均陽性,提示感染症狀期,或感染活躍期,或再次復發感染。

血清學抗體檢測存在窗口期,存在個體免疫應答差異,因此SARS-CoV-2特異性IgM和IgG抗體對早期COVID-19的檢測仍存在假陰性的可能,同時由於交叉反應,也可能產生假陽性,單獨使用SARS-CoV-2特異性IgM和IgG抗體在早期診斷與篩查上存在較大的漏診和一定的誤診風險。

綜上,SARS-CoV-2特異性IgM和IgG抗體的重要意義在於可以與核酸檢測聯合檢查,提高COVID-19診斷的敏感度。所以有一定機率誤診


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現在對武漢等10多個地區都在進行新冠病毒IgG抗體檢測,對國外歸國人員及一些復工復產單位的員工也進行檢測,如果陽性一般提示感染過新冠病毒,但是確實會有假陽性,就是沒感染過新冠病毒,但結果提示感染過。

坦率地講,這種假陽性很難完全避免,需要對結果進行科學的解讀與認識,一般也需要結合IgM抗體進行動態檢測。

造成特異IgG免疫測定假陽性,通常有以下兩方面的原因:

1.陽性判斷值附近的弱陽性,可能是假陽性

檢測判斷陽性與陰性,會設定一個分界值,高於這個值判斷為陽性,一些剛剛高於陽性判斷值附近的弱陽性,很多並不一定就是陽性,有可能就是假陽性;

膠體金試紙條檢測是通過肉眼觀察顏色有否來判斷陽性和陰性,不存在陽性判斷值的問題,但也會存在不同檢測者判斷的差異。

化學發光免疫試驗(CLIA)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)需要設定陽性判斷值,一般是通過測定大量的陰性人群(數千份)和一定數量(數百份)的已知陽性人群標本,得到一個分佈,用統計學方法確定陽性判斷值,通常為假陽性和假陰性均較低且達到平衡狀態時的測定信號,如OD值或發光值。

因此,不可避免地處於其周邊陽性一側的結果,會有一部分弱陽性,而實際為假陽性。

依據陰性和陽性人群檢測值的分佈確定陽性判斷值

2.血樣中存在導致假陽性的干擾物質

1)內源性干擾物

一般包括類風溼因子、嗜異性抗體、補體、因使用鼠源抗體治療或診斷誘導的抗鼠Ig 抗體等。在日常的臨床血清(漿)標本中,有相當比例的標本不同程度的含有上述各種干擾物質,從而可能導致測定結果的假陽性。

(1)類風溼因子(Rheumatoid factors,RF)

在類風溼患者、其他疾病包括部分正常人血清中,常含有較高或不同濃度的類風溼因子,其通常為IgM型,亦有IgG和IgA型,RF具有與變性IgG產生非特異結合的特點,因此在免疫測定中,其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨後加入的標記的特異抗體IgG結合,從而出現假陽性結果。

(2)嗜異性抗體(Heterophilicantibodies)

人類血清中可能會含有抗齧齒類動物(如鼠、馬、羊等)的抗體,即天然嗜異性抗體。有研究表明,天然的嗜異性抗體(IgG)可分為兩類,一類(85%的假陽性由其引起)可結合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域,但不與兔IgG的Fab區結合。另一類(15%的假陽性由其引起)可結合於小鼠、馬、牛和兔IgG的FC區表位,但不與山羊和大鼠IgG的FC區表位結合。嗜異性抗體可通過交聯固相和標記的單抗或多抗而出現假陽性反應。

(3)補體

在固相免疫測定中,來自哺乳動物的固相特異抗體和標記二抗均可以激活人補體系統。因為其在固相吸附及結合過程中,抗體分子發生變構, Fc段的補體C1q結合位點被暴露出來,這樣C1q就成為一箇中介物將二者交聯起來,從而出現假陽性結果。

(4)因使用鼠抗體治療或診斷誘導的抗鼠Ig抗體

在臨床上,有使用鼠源性單克隆抗體進行癌症等的靶向治療,或者使用放射性核素標記鼠源性單克隆抗體進行影像診斷等,均有可能使相應患者體內產生抗鼠抗體。這種抗鼠抗體對使用鼠源性單克隆抗體的免疫測定,可產生假陽性結果。

(5)溶菌酶

溶菌酶可與等電點較低的蛋白有強的結合能力。免疫球蛋白等電點約為5,因此,在免疫測定中,溶菌酶可在包被的IgG和標記的IgG間形成橋接,從而導至假陽性。

2)外源性干擾物

包括標本溶血、標本被細菌汙染、標本貯存時間過長和標本凝固不全等。

(1)標本溶血

如果樣本中的紅細胞破了,溶血導致血紅蛋白釋放,由於血紅素基團有類似過氧化物的活性,因此,在以辣根過氧化物酶(HRP)為標記酶的ELISA和CLIA中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其在溫育過程中會吸附於固相,從而與後面加入的HRP底物反應顯色或發光,導至假陽性。

(2)標本貯存時間過長

標本在2~8℃下保存時間過長,IgG可聚合成多聚體,在間接法免疫測定中會導致本底過深、甚至造成假陽性。


康壽研習社


存在,一般來說,在臨床如果IgM陰性、IgG陽性、核酸陰性則表示患者可能既往感染病毒,但身體抵抗力比較好,現在已經產生了抗體。


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