除了抗體和自發熒光的交叉反應,成年猴大腦皮質中是否有內源性神經發生?

成年靈長類動物的大腦皮質中是否存在內源性神經發生是一個有爭議的問題。近期許多報道顯示,新生神經元標記物DCX陽性神經發生在成年靈長類動物皮質中持續存在,這再次引起了全世界的極大關注。

中國河南理工大學劉若虛等的一項最新研究在免疫組織化學染色和蛋白質印跡實驗中,使用不同的不同的DCX及成熟神經元標記物NeuN抗體對成年獼猴大腦皮質的相鄰切片進行了標記,並通過應用組織吸收,抗原中和,一抗省略和無抗體實驗進一步研究其染色結果差異。結果發現,(1)應用不同DCX抗體在大腦皮質相鄰組織切片中可分別發現DCX強熒光標記的細胞,這些大腦皮質DCX陽性細胞與成熟神經元的特異性標誌物NeuN均有共定位關係;(2)進一步的免疫組織化學染色結果證明,這些共標記結果是由部分DCX抗體的交叉反應,部分二抗的非特異性或組織的自發熒光引起的,但不同於以往部分文獻的報道,我們也未通過免疫熒光的方法在成年獼猴大腦皮質中發現任何DCX陽性細胞;(3)上述數據證實,除了抗體和自發熒光的交叉反應之外,成年靈長類動物的大腦皮質中沒有DCX陽性神經發生。研究結果對於理解成人神經發生有重要貢獻。

文章研究成果發表在《中國神經再生研究(英文版)》雜誌2020年7月第7期。

文章摘要:成年靈長類動物的大腦皮質中是否存在內源性神經發生是一個有爭議的問題。近期許多報道顯示,新生神經元標記物DCX陽性神經發生在成年靈長類動物皮質中持續存在,這再次引起了全世界的極大關注。實驗在免疫組織化學染色和蛋白質印跡實驗中,使用不同的DCX及成熟神經元標記物NeuN抗體對成年獼猴大腦皮質的相鄰切片進行了標記,並通過應用組織吸收,抗原中和,一抗省略和無抗體實驗進一步研究其染色結果差異。結果發現,(1)應用不同DCX抗體在大腦皮質相鄰組織切片中可分別發現DCX強熒光標記的細胞,部分中等偏弱的標記細胞,僅在核周圍的局部標記,或者接近完全陰性的標記結果,這些所謂的大腦皮質DCX陽性細胞與成熟神經元的特異性標誌物NeuN均有共定位關係;(2)進一步的免疫組織化學染色結果證明,這些共標記結果是由部分DCX抗體的交叉反應,部分二抗的非特異性或組織的自發熒光引起的,但未通過免疫熒光的方法在成年獼猴大腦皮質中發現任何DCX陽性細胞;(3)上述數據證實,除了抗體和自發熒光的交叉反應之外,成年靈長類動物的大腦皮質中並未出現DCX陽性神經發生現象。

文章關鍵詞:成人神經發生;雙皮質素;交叉反應;新皮質;靈長類動物;組織吸附;抗原中和;NeuN;自發熒光;交叉反應;非特異性

文章來源:Liu RX, Ma J, Wang B, Tian T, Guo N, Liu SJ (2020) No DCX-positive neurogenesis in the cerebral cortex of the adult primate. Neural Regen Res 15(7):1290-1299.


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