非瘟“拔牙”式清除的關鍵——早期檢測,唾液採集5步曲


非瘟“拔牙”式清除的關鍵——早期檢測,唾液採集5步曲

豬場在發生非洲豬瘟以後會採取“拔牙”式清除讓豬群儘快穩定下來,拔牙是將陽性個體或群體從可能還未感染豬群中安全清除的方式,其關鍵是要做到早期診斷,否則一旦豬場呈現“多點式”發病,想要取得拔牙成功會增加難度,也會讓豬場遭受巨大的經濟損失。

實驗結果顯示,非洲豬瘟在自然感染情況下病毒最早出現在唾液中,較血液中出現病毒載量早3-4天,因此唾液檢測已然成為精準拔牙的重要手段。那麼如何做好唾液的採集與儲存,供以養豬從業者參考。


非瘟“拔牙”式清除的關鍵——早期檢測,唾液採集5步曲


1. 唾液樣品採集的方法

第一步,取出樣品採集袋,並放入樣品採集袋置於欄內豬隻容易接觸到的地方,樣品採集袋與採樣豬隻肩部同高,不可放在容易被汙染的如豬隻飲水或拉糞尿的區域,防止樣品在採集過程中被直接汙染。

第二步,待樣品採集袋被豬隻的唾液充分浸潤後,然後將唾液擠出到樣品收集袋內,對取樣後的樣品採集袋進行歸集,做焚燒等的無害化處理,防止其在場區內成為新的疫病傳染源。

第三步,將唾液擠出轉移到樣品收集管內,需要注意的是每個樣品至少2ml,取樣量太少不利於實驗室檢測的實施。

第四步,在唾液收集的過程中如果遇到雜質,如飼料、食物殘渣等,必要的時候需要做好離心,2000g的離心力,進行10分鐘的時間。

第五步,樣品收集管要要特別註明取樣豬場名稱,取樣棟舍以及取樣日期,對之後採取精準拔牙有著至關重要的作用(唾液樣品可以混合,但不宜超過5個樣品,過多會影響檢測的準確度)。

2. 唾液樣品的保存

對採集的唾液樣品在送往實驗室前需要保存在冰箱內,必須在24小時內送往實驗室進行檢測。如果不能或是要用作後期的複檢,則應將樣品保存於-20至-80℃冷凍保存,並且加入核酸保護液。

3. 唾液樣品採集的幾點注意事項

1)對計劃採集唾液樣本的豬群在前晚停料不停水,間隔10-12小時採集唾液,保證唾液裡面沒有食物殘渣,確保檢測結果不受影響。

2)對母豬或公豬可以單頭採集唾液,保育仔豬或育肥豬可以採集群體唾液。

3)採集完唾液,將唾液與核酸保護液按1:1,馬上擠到含核酸保護液的瓶中(唾液中的酶對病毒有降解作用),之後採用冰袋運至實驗室。

4)如果直接送至實驗室可以2~8℃保存,用於長期之後的複檢,需要-20至-80℃保存。


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