乙型肝炎病毒是一種DNA病毒,屬於嗜肝DNA病毒科,該科病毒以RNA中間體為模板經反轉錄合成DNA鏈。在電鏡下觀察,HBV感染者血清中存在三種形式的顆粒:Dane顆粒、小球形顆粒、絲狀或核狀顆粒。一般情況下,血清中小球形顆粒最多而Dane顆粒最少。
常用檢測方法:
在我國有50%~70%的人受過感染,由於乙型肝炎病毒疫苗的廣泛使用,乙肝表面抗原攜帶率約佔總人口的7.18%,屬於中度流行國家。目前乙型肝炎病毒感染主要有免疫學方法和分子生物學診斷方法。
其中免疫學方法臨床上常用的有酶聯免疫吸附法(ELISA),固相放射免疫法、膠體金免疫層析法、時間分辨免疫熒光法、微粒子酶免疫分析法、化學發光法及電化學發光法(ECLIA)等。
分子生物學方法主要進行HBV DNA的方法的檢測包括普通PCR、熒光定量PCR以及套式PCR。本文著重對免疫學方法中的酶聯免疫吸附法(ELISA)以及熒光定量PCR法這兩種常用HBV臨床診斷方法進行介紹。
圖1:電鏡下的乙肝病毒
兩種常用檢測方法分析:
(1)酶聯免疫吸附法(ELISA)
Elisa法是臨床上進行免疫學檢測乙肝病毒感染的常見方法,且通常是以檢測血液中的HBsAg為診斷指標。
優點:方法具有靈敏度高、特異度強、重複性好的特點,且操作簡單、試劑價廉、無放射性危害。
缺點:ELISA不能進行定量分析,在陽性判斷值周圍一定範圍之外的測定結果為測定的灰區,易引起假陰性。
臨床常已造成酶聯免疫吸附實驗假陰性的原因主要在於溶血、脂血、黃疸鉤狀效應引起的。另外試劑的選擇同樣重要,需要選擇正規廠家生產的檢驗合格產品並嚴格按照說明書進行檢驗操作。
(2)熒光定量PCR法
HBV病毒核酸(HBV-DNA)水平是直接反映HBV患者病毒複製水平,病毒血症程度,傳染性強弱的最佳指標,目前臨床上常採用熒光定量PCR可直接檢測血清中HBV-DNA的載量。
熒光定量PCR是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。
優點:熒光定量PCR法診斷乙型肝炎病毒感染技術術具有快速、特異性、靈敏度高等特點,因此,可以對乙型肝炎病毒感染進行早期診斷、乙型肝炎病毒感染的流行病學調查、檢測耐藥基因等,為臨床對乙型肝炎的診斷治療、療效觀察及預後評估等提供科學依據。
缺點:1:對人員及工作環境均有較高要求,所需的設備、試劑等成本也較高,分子診斷技術要像免疫學指標檢測那樣普及有一定難度。
2:分子診斷學起步較晚,雖然發展較快,但許多理論和技術方面的問題有待於進一步的探明、提高和完善。
檢測前患者有什麼需要注意的?
1、在做乙肝兩對半前應注意不要喝酒。
2、如果在檢查前還在服用某些藥物,那麼最好是在檢查前的一兩天就停止用藥,以免影響檢查。
3、在做乙肝兩對半檢查前,還注意保證充足的休息,因為睡眠不好、勞累等有可能影響檢查結果的準確性。
4、在檢查前天晚上最好不要吃油膩、辛辣的食物。
5、乙肝兩對半檢查前是不需要空腹的,不過如果還需要檢查肝功能、血脂等項目的話,就另當別論了。
做完了檢測,檢驗結果怎麼看呢?
一般的乙肝兩對半檢驗有五項指標,分別為:乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(抗-HBs)、乙肝E抗原(HBeAg)、乙肝E抗體(抗-HBe)、乙肝核心抗體(抗-HBc)。那麼這麼多抗原抗體代表啥呢?
這五項指標結果組合起來是什麼意思?
參考文獻:
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相關性分析[J].中國傷殘醫學,2013,21(5): 270-272。
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