精液冷冻程序

近些年,马、驴的精液冷冻技术进展很快,尤其是驴的冷冻精液配种效果要比马的好。这在吉林、山东两省的部分地区已大面积推广,应用于生产。

精液冷冻程序

1.原精液的处理 原精液用等温的缓冲液按1∶1的比例稀释。缓冲液配方:蒸馏水100毫升,葡萄糖6.5克,甘氨酸0.5克,鲜卵黄40毫升。

2.精液浓缩 将稀释后的精液分装于10毫升的离心管内,在室温15℃~25℃下,放人1 500转/分钟离心机内离心5~10分钟,达到离心后的上部精液与下部精子粥界限明显。离心后,用吸管吸出上清液,弃掉,留下精子粥。

3.精子粥的稀释 稀释前,应按配方配好以下两种稀释液。

基础1液:蒸馏水100毫升,蔗糖8克,葡萄糖4克,溶解后消毒。

基础2液:蒸馏水100毫升,乳糖10克,溶解后消毒。

驴采用“三糖”血清液稀释。配制100毫升“三糖”血清液,取基础1液25毫升,基础2液25毫升,驴血清25毫升,卵黄20毫升,甘油5毫升。

配制好“三糖”血清液后,按1 ∶1的比例稀释精子粥。将稀释后的精子粥集中到一个试管内进行平衡。

4.平衡 放在冰箱内,在6℃~8℃温度下,保持25~30分钟。

5.滴冻颗粒 平衡后的精液可放在6℃~8℃冷水器中备用,继之将降温铝板投入液氮槽,预冷3~5秒钟后,固定在距液氮面4厘米处。最后用牙科吸管吸取精液,在铝板上滴0.5毫升圆形颗粒。滴完一盘后盖上液氮槽,将铝板降到距液氮面1厘米处,停5分钟,听到干裂声时,将颗粒集中投入液氮罐中贮存。

6.解冻 解冻是将贮存的冷冻颗粒解冻成精液,供输精用。解冻时,要加入解冻液。解冻液由蒸馏水100毫升,奶粉4克,葡萄糖5克,配合消毒而成。解冻时,将10毫升解冻液升温到40℃后,投人1粒冻精颗粒,然后摇晃烧杯,以加快溶解。解冻后放人恒温箱中,复苏约10分钟后,经镜检合格时,即行输精。

实践证明,冷冻精液解冻后存活时间较短,所以要求做到输入的精子在体内尽快与排出的卵子相遇,以提高受胎率。这就要求做到掌握排卵时间,多次直检。适时输精是提高受胎率的关键。

细管冷冻精液,因冷冻和解冻时,冻精内外温度一致,因而活力较颗粒冷冻精液好,现推广细管冻精技术。


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