多年来，流式实验中同种型对照被广泛用作阴阳性界定的标准，但实验显示其存在较大的变异性，受到越来越多的质疑。
实验证实在MNCs中，非特异性结合主要是单核细胞，主要是IgG1和IgG2a同种型，而IgG2b同种型则没有实质性结合。
而这些同种型对照的非特异性结合可以被市售的Fc-block，人或小鼠血清以及高浓度的纯化人或小鼠IgG完全阻断。
重要的是，没有一种测试的封闭剂会对特异性mAb或活/死染料的染色质量产生负面影响。
对于免疫荧光染色，使用鼠源mAb染色人细胞时，人IgG封闭效果优于鼠IgG。
人和小鼠血清并不会由于免疫球蛋白浓度不足而封闭效果差，均可有效阻断非特异性mAb结合。2.5％人A血清封闭的样品中，最终IgG浓度约为≈250μg/ mL，这表明低至1％的人血清可能与100μg/ mL人IgG一样有效。但血清可能会影响细胞的激活状态，如影响表面抗原表达和细胞因子产生。此外，不同批次的血清可能含有浓度可变的生物活性化合物，如内毒素/脂多糖可以激活细胞并导致表面蛋白的裂解。因此，使用血清作为封闭剂可能会导致数据变化并限制实验室内部和实验室之间的可比性。
故而用纯化的IgG比血清封闭更可取，原因有几个：可以将其在4°C下长时间保存；它相对便宜；批次间的差异小；最重要的是，它不像血清成分复杂多变。此外，使用人IgG（而不是小鼠IgG）封闭兼容抗小鼠Ig二抗的间标。最后，市售的Fc阻滞剂也很有效，但有两个明显的缺点：成本相对较高，制造商未提供有关产品活性化合物的详细信息。
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