ONPG培養基
ONPG Broth
原理和說明
ONPG(鄰硝基苯基β-D-半乳糖吡喃 糖苷)是一種合成的無色化合物(半乳糖苷),其結構與乳糖相似【1】。β-半乳糖苷酶陽性微生物將ONPG裂解為半乳糖和一種黃色的化合物鄰硝基苯。ONPG試驗對於快速鑑定隱性乳糖發酵菌(遲緩發酵菌)效果很好。
傳統乳糖發酵試驗中需要兩種酶的參與。第一種是滲透酶,它促進乳糖分子進入細菌體內,第二種酶是β-半乳糖苷酶,它可水解乳糖,產生葡萄糖和半乳糖。真正的非乳糖發酵菌同時缺乏這兩種酶。然而,遲緩乳糖發酵菌缺乏滲透酶,但含有β-半乳糖苷酶。ONPG可迅速滲入細菌細胞內,無須滲透酶的存在,因而可快速鑑定遲緩乳糖發酵菌。
組成
配製:
在1000ml蒸餾水中重懸13.10g乾粉培養基。加熱沸騰直至完全溶解。冷卻至45-50℃,分裝至無菌試管。請勿高壓滅菌。
質量控制
外觀
乳白色至黃色均勻自由流動的粉末。
製備的培養基顏色和透明度
管內為淡琥珀色透明溶液。
pH值
7.30-7.70
培養反應
在35-37℃下孵育18-48小時後,觀察培養反應。
儲存和保質期
乾粉培養基和製備後的的培養基均在2-8℃保存。在標籤上的效期內使用。
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