精液冷凍程序

近些年,馬、驢的精液冷凍技術進展很快,尤其是驢的冷凍精液配種效果要比馬的好。這在吉林、山東兩省的部分地區已大面積推廣,應用於生產。

精液冷凍程序

1.原精液的處理 原精液用等溫的緩衝液按1∶1的比例稀釋。緩衝液配方:蒸餾水100毫升,葡萄糖6.5克,甘氨酸0.5克,鮮卵黃40毫升。

2.精液濃縮 將稀釋後的精液分裝於10毫升的離心管內,在室溫15℃~25℃下,放人1 500轉/分鐘離心機內離心5~10分鐘,達到離心後的上部精液與下部精子粥界限明顯。離心後,用吸管吸出上清液,棄掉,留下精子粥。

3.精子粥的稀釋 稀釋前,應按配方配好以下兩種稀釋液。

基礎1液:蒸餾水100毫升,蔗糖8克,葡萄糖4克,溶解後消毒。

基礎2液:蒸餾水100毫升,乳糖10克,溶解後消毒。

驢採用“三糖”血清液稀釋。配製100毫升“三糖”血清液,取基礎1液25毫升,基礎2液25毫升,驢血清25毫升,卵黃20毫升,甘油5毫升。

配製好“三糖”血清液後,按1 ∶1的比例稀釋精子粥。將稀釋後的精子粥集中到一個試管內進行平衡。

4.平衡 放在冰箱內,在6℃~8℃溫度下,保持25~30分鐘。

5.滴凍顆粒 平衡後的精液可放在6℃~8℃冷水器中備用,繼之將降溫鋁板投入液氮槽,預冷3~5秒鐘後,固定在距液氮面4釐米處。最後用牙科吸管吸取精液,在鋁板上滴0.5毫升圓形顆粒。滴完一盤後蓋上液氮槽,將鋁板降到距液氮面1釐米處,停5分鐘,聽到乾裂聲時,將顆粒集中投入液氮罐中貯存。

6.解凍 解凍是將貯存的冷凍顆粒解凍成精液,供輸精用。解凍時,要加入解凍液。解凍液由蒸餾水100毫升,奶粉4克,葡萄糖5克,配合消毒而成。解凍時,將10毫升解凍液升溫到40℃後,投人1粒凍精顆粒,然後搖晃燒杯,以加快溶解。解凍後放人恆溫箱中,復甦約10分鐘後,經鏡檢合格時,即行輸精。

實踐證明,冷凍精液解凍後存活時間較短,所以要求做到輸入的精子在體內儘快與排出的卵子相遇,以提高受胎率。這就要求做到掌握排卵時間,多次直檢。適時輸精是提高受胎率的關鍵。

細管冷凍精液,因冷凍和解凍時,凍精內外溫度一致,因而活力較顆粒冷凍精液好,現推廣細管凍精技術。


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