脫細胞豬膀胱支架的構建

摘要:

脫細胞豬膀胱支架的構建

文題釋義:

脫細胞:生物移植或修補材料製備過程中常用到脫細胞方法,脫細胞能很好的保留組織的成分,降低移植或修補後的免疫原性,同時保持良好的機械性能,在臨床上得到較為廣泛的應用。

豬膀胱支架:利用不同的脫細胞方法去除豬膀胱組織中的細胞後製備為豬膀胱支架,既保留了細胞外基質的完整性,又可以降低移植後排斥反應,為進一步的對組織工程支架材料的研究奠定了可行的基礎。

背景:膀胱修補術是目前臨床上治療膀胱缺損的主要方法之一,同源性組織因各種因素的影響來源較少,組織工程膀胱脫細胞基質受到人們越來越多的關注。豬膀胱脫細胞外基質來源廣泛,具備天然的細胞外支架結構,成為組織工程膀胱替代材料研究的熱點。

目的:研究脫細胞豬膀胱作為組織工程支架材料的可行性。

方法:取新鮮的豬膀胱,聯合液氮凍融、十二烷基硫酸鈉、胰蛋白酶脫細胞方法制豬膀胱無細胞基質。按不同脫細胞方法分組:①正常對照組:不做任何處理;②實驗組:0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸鈉(pH 8.0);③脫細胞對照組:分別用0.75%胰蛋白酶(pH 8.0)、1%胰蛋白酶(pH 8.0)、5%十二烷基硫酸鈉(pH 7.6)或10%十二烷基硫酸鈉(pH 7.6)處理。通過蘇木精-伊紅染色和VG染色、DNA定量、α-Gal抗原檢測,觀察豬膀胱脫細胞效果。

結果與結論:蘇木精-伊紅染色顯示實驗組豬膀胱細胞成分已基本去除;VG染色顯示實驗組完整保留了豬膀胱組織的細胞外基質成分;實驗組的DNA殘留量僅為(49.84±30.13) μg/g,顯著低於幾個脫細胞對照組(P < 0.05);同時其α-Gal抗原殘留也明顯低於脫細胞對照組。提示:應用0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸鈉處理豬膀胱,在完整保留豬膀胱組織細胞外基質的同時,可有效去除其細胞成分,為構建脫細胞豬膀胱支架提供一定參考價值。

ORCID: 0000-0003-1004-7390(李芹)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 納米材料; 緩釋材料; 材料相容性;組織工程

關鍵詞: 豬膀胱, 生物支架材料, 脫細胞, 十二烷基硫酸鈉, 胰蛋白酶

文章來源: 李 芹, 夏翠萍, 劉曉紅, 徐志雲, 龔德軍, 吳 昊. 脫細胞豬膀胱支架的構建[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(4): 572-576.


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