哺乳动物细胞培养基的种类

哺乳动物细胞培养基是供哺乳动物细胞(包括原代细胞和细胞系)生长、增殖或者分化的人工配制的营养液,一般可分为天然培养基和人工合成培养基。

在20世纪早期,从事细胞培养用的培养液都是天然培养基,如用淋巴液和血浆等。到20世纪中期,随着一些营养物质的化学合成和工业发展,细胞生物学家开发出人工合成的培养基配方。一开始即要寻找细胞生长最低需要满足哪些营养。后来随着不同细胞的营养需求,又增加了其他的营养成分,但都是要配合牛血清(最常用胎牛血清)一起使用。原因在于经典的合成培养基都不含蛋白质、脂类和生长因子以及其他某些必要的营养成分,因此需要胎牛血清来额外提供这些营养物质。通常胎牛血清的量是加5%-20%。

哺乳动物细胞培养基的种类

那么有哪些经典合成的培养基呢?有如下几种:

1、BME(Basal Medium Eagle): 它是由美国生理学家Harry Eagle开发的基础培养基。它最初是根据Hela细胞和小鼠的成纤维L细胞所需的最低营养而设计的。它包含无机盐、氨基酸和维生素等。后来许多培养基在它基础上设计而成。

2、MEM(Minimum Essential Medium Eagle): MEM培养基也是Harry Eagle在BME配方基础上改良而成。它比BME含有更高浓度的氨基酸,可同时用于贴壁细胞和悬浮细胞,例如HeLa、BHK-21、293、MCF-7细胞等。

3、DMEM:即意大利生理学家Dulbecco改良的Engle培养基。DMEM最常用,能支持很多贴壁细胞生长,包括原代的成纤维细胞、神经元、HUVECs、平滑肌细胞以及一些细胞系如Hela(常用于癌症和信号转导研究)、293(常用于外源蛋白表达)、Cos-7(常用于转染研究)等。

4、GMEM(Glasgow's Minimum Essential Medium):是对BME培养基的改良型,添加有10%的胰蛋白䏡磷酸盐以及2倍浓度的氨基酸和维生素,适合培养BHK细胞等。

5、MEMα:是MEM培养基的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸钠、硫辛酸、维生素B12、生物素和抗坏血酸。可作为DG44和其他DHFR阴性细胞的选择培养基。也可用于培养角质细胞、原代大鼠星形细胞和人黑色素瘤细胞。

6、DMEM/F12: 它将 DMEM 的高浓度葡萄糖、氨基酸及维生素与 F-12的广泛组分结合在一起,营养更丰富,可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长,包括 MDCK、胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及小鼠成纤维细胞。

7、RPMI-1640:主要用于培养悬浮细胞。它含有还原剂谷胱甘肽和高浓度维生素(如肌醇、胆碱),还包括生物素、维生素B12等MEM、DMEM没有包含的成分。

8、M199:1950年由Morgan, Morton和Parker开发而成,最初用于原代鸡胚成纤维细胞的营养研究。现在常用于非转化细胞和原代移植上皮细胞的培养以及疫苗和病毒的生产。

9、IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium):是DMEM的改良型,添加有硒、氨基酸和维生素,但缺乏铁。用于快速生长的高密度细胞,例如 Jurkat, COS-7和巨噬细胞。

10、Leibovitz's L-15:用于培养无CO2环境的细胞。原先的碳酸氢钠缓冲系统被游离碱性氨基酸、磷酸盐和高浓度的半乳糖和丙酮酸钠所替代。无须经常更换培养基。常用于病毒学诊断等密闭培养细胞的场合。

11、McCoy's 5A:由Thomas McCoy最早开发该配方。包含有谷胱甘肽、蛋白胨和高浓度葡萄糖。常用于培养来自正常骨髓,皮肤,牙龈,睾丸,小鼠肾,网膜,肾上腺,肺,脾,大鼠胚胎等的原代细胞。

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