食品中常采用微生物的方法测定叶酸的含量，在第18版的 AOAC 标准方法中，食物中生物素、泛酸、叶酸、VB12和烟酸的第一分析方法均为微生物法；我国食品安全国家标准中关于婴幼儿食品和乳品中叶酸含量的测定，微生物法是唯一的测定方法。
用于维生素测定的培养基通常需要三种：维持培养基、接种培养基和测定用培养基。微生物法的原理是，采用鼠李糖乳杆菌（ATCC 7469）为测定用菌，根据细菌对叶酸的营养需求，在一系列不含叶酸的培养基中从低到高添加已知含量的叶酸以及待测的食品样品，在37°C温度下培养18h。培养基中因为添加了叶酸，能促进细菌生长，培养液发生浑浊。细菌越多，培养基就越浑浊，吸光度就越高。通过已知含量的叶酸样品的吸光度，以及待测样品的吸光度，确定待测样品中的叶酸含量。
应用微生物法测定叶酸含量时，国产的叶酸培养基中，无维生素酸水解酪蛋白中的维生素祛除不彻底，特别是含有部分叶酸，会造成试验中本底偏高，给叶酸测定结果带来偏差。国际上HiMedia公司生产的叶酸测定用培养基（货号：M543），该培养基的特点是不含痕量叶酸，有效避免标准曲线偏移和本底过高，测定结果准确可靠；HiMedia的叶酸培养基是一款完整配方培养基，直接加水溶解就可以使用，实验人员无需自己费时配置，节省实验时间。
HiMedia的叶酸培养基M543在生产过程中严格执行GMP车间生产，具有优质的品质保证。由国际认证的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等证书，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全国家标准 食品中叶酸的测定》，是食品、生物、医疗等领域的首选产品。
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