大肠杆菌?出血?腹泻?抑制实验做成了

肠道菌群与人和动物的健康息息相关,它的“喜怒哀乐”会影响到人的方方面面。20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症。我们今天就来讲实验发现,抑制大肠杆菌,它居然也可以。

大肠杆菌?出血?腹泻?抑制实验做成了

1 细菌分离与染色形态特征

从鸡肠道中分离了6 株细菌(分别标记为1号、3号、5号、6号、7号、8号)。这6株菌在0.75%CaCO3的MRS培养基上长出乳白色菌落,染色镜检为G+杆菌,结果见表1、图1、图2。

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2 生化鉴定结果

对分离得到的6 株菌分别进行过氧化氢酶试验、明胶液化试验、硫化氢试验、各种糖发酵试验及乳酸菌微管鉴定试验,结果见表2、表3。

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根据菌落形状大小、革兰氏染色镜检特性,以及各生化反应结果,参考《乳酸菌分类鉴定及实验方法》和《常见细菌系统鉴定手册》进行综合判定,确定得到的纯化菌株种属。乳酸菌种的鉴定结果:1号为微小乳酸菌(L.minor),3号为约氏乳杆菌(L.johnsonii),5 号为弯曲乳杆菌(L.curvatus),6号为肠乳杆菌(L.intestinalis),7号为嗜酸乳杆菌(L.acidlophilus),8号为植物乳杆菌(L.plantarum)。

3 体外抑菌试验结果

6株乳酸杆菌的体外抑菌试验结果见表4。微小乳酸菌不敏感,约氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌为低度敏感,弯曲乳杆菌、肠乳杆菌为中度敏感。相对来说抑菌效果最佳的是肠乳杆菌。

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4 结论与讨论

本试验材料是小鸡的肠道粘膜。乳酸菌在动物的不同种属、不同年龄、不同消化道部位的含量不同。鸡日龄越大,肠道中的乳酸菌含量越少;鸡胃和小肠中的乳酸菌含量比大肠和粪便中的多。冲洗食糜,从粘膜上分离乳酸菌就是为了避免从饲料中带入细菌造成的影响。小鸡价格便宜,体型较小,因此小鸡肠道粘膜作为试验材料是比较理想的。

在鸡肠道内的多种细菌中,最具代表性的有益菌是乳酸杆菌。临床试验和实验室研究表明,乳酸菌对肠道内的细菌,如大肠杆菌、沙门氏菌等所引起的肠道感染有较为明显的拮抗作用。乳酸菌分离后的抑菌试验也对此有所证实,尤其是对致病性大肠杆菌有一定的抑制作用,可以作为益生素的备用菌株。本研究为开发应用乳酸菌提供了参考依据和菌种保证。

参考文献

[1]刘鸽,刘绒欢等. 鸡肠道内乳酸菌的分离鉴定及体外抑菌试验[J].中国动物检疫,2017,34(1):86-89.

[2] FULLER R. Probiotics in man and animals[J]. J.Appl.Bacteriol,1989,66:365-378.


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