疯狂至极！又一团队成功合成新冠病毒，或改造出大量病毒活体

根据世界卫生组织发布的数据，新冠肺炎疫情已扩散至200个国家和地区，全球确诊病例累计超过100万例，死亡5万余例。这些数字每天都会更新，而且预计还会进一步增加。但是，

2020年4月4日，德克萨斯大学医学院师培勇等团队在Cell Host & Microbe在线发表题为“An infectious cDNA clone of SARS-CoV-2”的研究论文，该研究报告了SARS-CoV-2的反向遗传合成策略。将跨越SARS-CoV-2基因组的七个cDNA片段组装成一个全基因组cDNA。在体外将cDNA转录成为有感染性的病毒RNA，通过电穿孔将RNA导入后，进入细胞后具有高度感染性，产生2.9×10^6 PFU / ml病毒体。

与临床分离株相比，克隆来源的SARS-CoV-2（icSARS-CoV 2）表现出相似的噬菌斑形态，病毒RNA谱和复制动力学。此外，icSARS-CoV-2保留了工程分子标记，并且未获得其他突变。通过将这种报告基因导入病毒基因组的OFR7中，可以生成稳定的mNeonGreen SARS-CoV-2（icSARS-CoV-2-mNG）。icSARSCoV-2-mNG已成功用于评估干扰素的抗病毒活性。总的来说，这项研究开发的新系统，突破了病毒来源的限制，能够在短时间内（一周）大量生产或改造活性病毒，以用于疾病诊断、动物模型建立、中间宿主确认、疫苗研发等研究。

另外，2020年2月21日，瑞士

由于新病例的迅速增加，2019年冠状病毒病（COVID-19）很快引起了全球关注。新型冠状病毒感染被认为是从动物传播的，病原体被鉴定为SARS-CoV-2。到2020年1月，怀疑最初受感染的患者是通过人与人之间的传播感染了该病毒。自2020年1月以来，该病毒已迅速传播到中国大部分地区和其他国家。截至2020年4月4日，全球确诊病例累计超过100万例，死亡5万余例。这些数字每天都会更新，而且预计还会进一步增加。

全长SARS-CoV-2感染cDNA克隆的装配

冠状病毒（CoVs）是迄今为止被鉴定出的最大的RNA病毒，冠状病毒科分为4个属，分别为α，β，δ和γ冠状病毒，而β冠状病毒又分为A，B ，C和D谱系。可以感染人类的七种冠状病毒（HCoV）包括α冠状病毒中的HCoV-229E和HCoV-NL63，β冠状病毒谱系A中的HCoV-OC43和HCoV-HKU1，β-冠状病毒谱系B中的SARS-CoV和SARS-CoV-2；β-冠状病毒谱系C中的MERS-CoV。

瑞士伯尔尼大学的Jorerg Jores和Volker Thiel团队在生物预印本网站BioRxiv上发表了题为：Rapid reconstruction of SARS-CoV-2 using a synthetic genomics platform 的研究论文。该研究展示了基于酵母的合成基因组学平台的完整功能，能够在合成基因片段后一周内，对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）进行工程改造和复活。无需从病人体内分离病毒，直接使用酵母快速生产出大量有活性的新型冠状病毒

该研究报告了SARS-CoV-2的反向遗传合成策略。将跨越SARS-CoV-2基因组的七个cDNA片段组装成一个全基因组cDNA。在体外将cDNA转录成为有感染性的病毒RNA，通过电穿孔将RNA导入后，进入细胞后具有高度感染性，产生2.9×10^6 PFU / ml病毒体。

mNeonGreen病毒的稳定性和应用

与临床分离株相比，克隆来源的SARS-CoV-2（icSARS-CoV 2）表现出相似的噬菌斑形态，病毒RNA谱和复制动力学。此外，icSARS-CoV-2保留了工程分子标记，并且未获得其他突变。通过将这种报告基因导入病毒基因组的OFR7中，可以生成稳定的mNeonGreen SARS-CoV-2（icSARS-CoV-2-mNG）。icSARSCoV-2-mNG已成功用于评估干扰素的抗病毒活性。总的来说，这项研究开发的新系统，突破了病毒来源的限制，能够在短时间内（一周）大量生产或改造活性病毒，以用于疾病诊断、动物模型建立、中间宿主确认、疫苗研发等研究。

参考消息：

https://marlin-prod.literatumonline.com/pb-assets/products/coronavirus/CHOM_2291_s50_preproof.pdf

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