miR-155干預燒傷急性肺損傷模型大鼠:核轉錄因子κB通路的變化

摘要:

miR-155干預燒傷急性肺損傷模型大鼠:核轉錄因子κB通路的變化

文題釋義:

miR-155:作用於靶基因抑制性κB激酶家族相關死亡域蛋白,減弱核轉錄因子κB活性,按照次級效應方式對炎性因子的釋放產生抑制效果,降低機體損傷。

慢病毒載體:是以人類免疫缺陷Ⅰ型病毒為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體,它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。

背景:目前有研究關注核轉錄因子κB通路在燒傷大鼠急性肺損傷病理過程中的作用及機制,如miR-155靶向抑制KB激酶,進而減弱核轉錄因子κB活性,在燒傷大鼠急性肺損傷發揮作用,然而仍存在病理機制有待研究和確認。

目的:觀察miR-155通過核轉錄因子κB通路對燒傷大鼠急性肺損傷的影響。

方法:採用溫水水浴模擬燙傷法建立燒傷急性肺損傷大鼠模型,將燒傷大鼠隨機分為燒傷急性肺損傷組、miR-155增強試劑組和miR-155抑制試劑組,液體復甦後,miR-155增強試劑組、miR-155抑制試劑組大鼠分別尾靜脈注入5 μL的miR-155-mimics和miR-155-inhibitions。酶聯免疫吸附劑測定肺泡灌洗液中腫瘤壞死因子α、白細胞介素1β的變化情況;蘇木精-伊紅染色法觀察3組肺組織形態變化;Western blot法檢測核轉錄因子κB及環氧化酶2蛋白表達;免疫組織化學染色檢測肺組織核轉錄因子κB蛋白表達。

結果與結論:①蘇木精-伊紅染色結果表明,miR-155抑制試劑組、燒傷急性肺損傷組及miR-155增強試劑組肺組織損傷程度,逐漸加重(P < 0.05);②酶聯免疫吸附實驗結果表明,與燒傷急性肺損傷組相比,miR-155增強試劑組腫瘤壞死因子α、白細胞介素1β表達增加(P < 0.05),而miR-155抑制試劑組腫瘤壞死因子α、白細胞介素1β表達降低(P < 0.05);③Western結果表明,與燒傷急性肺損傷組相比,miR-155增強試劑組核轉錄因子κB、環氧化酶2蛋白表達增加(P < 0.05),而miR-155抑制試劑組核轉錄因子κB、環氧化酶2蛋白表達降低(P < 0.05);④免疫組織化學染色結果顯示,miR-155抑制試劑組核轉錄因子κB蛋白表達增強,呈深棕色,中性粒細胞、單核巨噬細胞、肺泡上皮細胞的胞質及胞核內核轉錄因子κB表達最明顯;⑤上述數據證實,肺組織細胞中核轉錄因子κB活性降低,可以通過下調miR-155來實現,從而降低肺損傷組織間的炎症反應。實驗於2018年6月經內江市第一人民醫院動物倫理委員會批准(批准號:1801270)。

ORCID: 0000-0002-3169-5146(黎鴻章)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:組織構建;骨細胞;軟骨細胞;細胞培養;成纖維細胞;血管內皮細胞;骨質疏鬆;組織工程

關鍵詞:

miR-155, 大鼠, 急性肺損傷, 模型, 核轉錄因子κB, 環氧化酶2, 炎症, 白細胞介素1β, 腫瘤壞死因子α, 蘇木精-伊紅染色

文章來源: 黎鴻章, 楊 坤, 劉玉文, 劉 攀, 邱 波, 鄒 傑. miR-155干預燒傷急性肺損傷模型大鼠:核轉錄因子κB通路的變化[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(2): 204-208.


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