昨天晚上有老師諮詢我們裸鼠皮下成瘤的實驗 怎麼做，我們做的效果怎麼樣。
口說無憑，各位老師看一下我們具體的實驗吧，下方提供的圖片都是我們動物平臺的小夥伴做的呢，老師們覺得有什麼地方可以指點的，可以直接聯繫我們 ~
應用範圍：
裸鼠荷瘤就是將細胞或組織通過原位或皮下移植到裸鼠體內，使其成瘤。無胸腺裸鼠（Nude Mouse，簡稱裸鼠）目前是醫學生物學研究領域中不可缺少的實驗動物模型。由於其先天性胸腺缺陷，缺乏T淋巴細胞功能，導致其在腫瘤學、免疫學、藥品與生物製品的安全性評價及有效藥品的篩選等實驗方面，有著很高的研究價值。
優點：
1.讓一群裸鼠帶有相同腫瘤，生長速率大致相同，個體差異較小，存活率高。
2可連續移植，腫瘤長期保留。
3實驗週期較短，實驗條件易於控制。
4對宿主的影響類似，可以客觀判斷療效。
實驗過程
細胞準備
1.同的細胞成瘤能力不同，在選擇時應根據實驗目的和具體情況綜合考慮。如乳腺癌細胞系MCF-7雖然經常用於體外實驗，但成瘤慮差，生長慢，因此一般不考慮。
2.一般分為鼠源的和人源的細胞系，鼠源的一般更容易成瘤，但人源的更貼近人類腫瘤生長情況。
3.取凍存於液氮的腫瘤細胞復甦並擴增，確保腫瘤細胞的活力和較好的生長狀態。一般鼠源腫瘤細胞接種2-100萬/只，人源的細胞系需要200-1000萬/只以上。可結合細胞和裸鼠的實際情況，最高可以注射1000萬/0.1ml，不可再高，因為細胞幾乎達到飽和狀態。
注意計算好細胞用量，一般要多準備5只裸鼠左右細胞用量。
裸鼠準備
一般選擇5-6w齡的裸鼠，太小死亡率太高，太大免疫力會增強，不易成瘤。如無特殊要求雌雄均可。
接種步驟
- 胰酶消化細胞，計數後將其重懸於生理鹽水中
- 選擇進針部位（一般選擇腋下或腹股溝等血管豐富的部位），用酒精棉球擦拭進針部位
- 向前方穿行，注射前針頭左右動一下，若無阻力則證明在皮下，否則可能在皮內或肌肉裡面
- 緩慢推注，一般體積為100-150μL，注射完後緩慢拔出針頭，可在注射部位看到明顯的鼓包
- 接種點離進針點儘量遠一些，防止漏液和汙染
結果處理
一般接種5天后即可看到腫瘤出現，根據實驗要去的生長天數，達到時間後頸椎脫臼處死裸鼠，取出腫瘤，拍照。拍照時需要放置兩把直尺，可用於後期計算腫瘤體積。
數據提交示例
拍照時注意光線，標尺擺放整齊，對焦不要模糊，另還需提交帶有各腫瘤體積的EXCEL表，如下所示：
問題解答:
（1）瘤子長不出來是怎麼回事？
一方面可能是細胞狀態差，活力不好，或是腫瘤細胞不易成瘤，需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細胞系 ；一方面可能是小鼠周齡太大，或小鼠免疫排斥，建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠（Nod-scid小鼠，NOG小鼠＞Nude裸鼠）
（2）小鼠瘤子長起來又消失？
腫瘤塊先縮小，後變大很常見，很可能是炎症反應，腫瘤細胞被小鼠自身吸收，繼續觀察腫瘤細胞吸收之後是否經過幾周還能長出來，長不起來建議換鼠。
（3）均一性很差，腫瘤體積差距較大？
如果荷瘤分組發現小鼠腫瘤體積差距很大，這可能跟小鼠周齡及接種細胞量不一致導致，建議重新做實驗分組。
（4）是否可以在一隻小鼠進行多個點荷瘤？
不可以，一隻老鼠就只能接種一個點。因為一個老鼠身上有多個腫瘤塊的情況下，可能會相互影響。
（5）是否應用免疫抑制劑加速腫瘤生長？
如果裸鼠荷瘤不生長，可以參考文獻，用免疫抑制劑如環磷酰胺（抑制裸鼠NK細胞活性）促進生長；不過最好不要為了縮短造模週期來加速生長，因為可能會造成潰爛，這樣就不得不中止實驗。所以一般情況下，應儘量符合細胞系本身的生長特性，不應過多地人為的干擾。
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