中文名：李斯特菌動力生化試劑盒
英文名：HiMotility™ Biochemical Kit for Listeria
品牌：Himedia
貨號：KBM003A
規格：5KT
用途：鑑定【李斯特菌】
概況
該試劑盒為標準化的顯色檢測系統，通過李斯特菌特異性的動力學、糖發酵和生化反應進行鑑定。微生物的發酵反應，引起培養基顏色發生變化。
用途
鑑定李斯特菌
使用說明
待鑑定菌種應先進行分離和純化。可在PALCAM瓊脂（貨號：M1064）上挑取一個菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯（貨號：M210）中，在35-37℃培養6-8小時，直到接種液濁度位於0.5-1.0McFarland標準之間。
無菌打開試劑盒，撕掉封條。劃線接種第1孔，不要接種第2孔。接下來用接種環接種第3至第12孔。接種液應到達孔底部。在35℃-37℃孵育18-24小時。
結果判定
依據結果詮釋表。在24-48小時孵育期結束後，在第4孔、第5孔和第6孔，分別添加如下試劑：
1) 動力試驗+七葉苷水解試驗：第1孔和第2孔
動力：有動力則菌落生長從第1孔轉移到第2孔，伴隨培養基變黑。
七葉苷水解：陽性則第1孔變黑，有動力則第2孔也變黑。
2）觸酶試驗：第3孔
用接種環刮取第1孔內表面，將接種環蘸到含3%H2O2的乾淨小試管中。
接種環表面冒泡為陽性。
接種環表面沒有冒泡為陰性。
注意：3%的H2O2需新鮮配置。
3）硝酸鹽還原試驗：第4孔
加1-2滴對氨基苯磺酸（貨號：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（貨號：R009）
立即出現粉紅色為陽性
顏色無變化為陰性
4）伏-普試驗：第5孔
加3-4滴Barritt試劑A(貨號：R029)和1-2滴Barritt試劑B（貨號：R030）
10分鐘內出現粉紅色為陽性
無顏色變化或有輕微變化為陰性。
5）甲基紅試驗：第6孔
加1-2滴甲基紅試劑（貨號：I007）
試劑保持紅色為陽性
試劑脫色變黃為陰性
6）糖發酵試驗：第7孔-第12孔
酸產生導致培養基顏色由紅變黃，為陽性反應。
如果仍保持紅色，則為陰性。
12種生化反應
1+2 動力試驗+七葉苷水解試驗
3 觸酶試驗
4 硝酸鹽還原試驗
5 伏普試驗
6 甲基紅試驗
7 木糖發酵試驗
8 乳糖發酵試驗
9 α-甲基-D-甘露糖苷
10 鼠李糖發酵試驗
11 葡萄糖發酵試驗
12 甘露醇發酵試驗
鑑定的李斯特菌物種
格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）
單核細胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）
英諾克李斯特菌（Listeria innocua）
斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）
伊氏李斯特氏菌伊氏亞種（Listeria ivannovii Sub sp. ivannovii）
伊氏李斯特菌倫敦亞種（Listeria ivannovii Sub sp. londoniesis）
威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）
儲存條件及保質期
2℃-8℃；12個月
引用文獻
1.Jitender Singh,etal. A Molecular Beacon-Based Duplex Real-Time Polymerase Chain ReactionAssay for Simultaneous Detection of Escherichia coli O157:H7 and Listeriamonocytogenes in Milk and Milk Products. Foodborne Pathogens andDisease. Dec 2009. 6(10). http://doi.org/10.1089/fpd.2009.0310.
2.Singh, J., Batish,V.K. & Grover, S. Molecular beacon based real-time PCR assay forsimultaneous detection of Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in dairyproducts. Dairy Science & Technol. (2011) 91: 373. https://doi.org/10.1007/s13594-011-0007-8
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