人尿源性干细胞体外向神经元样细胞诱导分化及对大鼠脊髓损伤的保护作用

摘要:

人尿源性干细胞体外向神经元样细胞诱导分化及对大鼠脊髓损伤的保护作用

文题释义:

人尿源性干细胞:是近年来新发现的成体干细胞,具有自我增殖能力和多向分化能力,可能是细胞治疗或组织工程的一种具有应用前景的种子细胞,其来源于尿液,不受伦理和取材限制,同时提取简便,已逐渐引起学者的青睐,近年来已应用于泌尿系疾病的治疗和修复。

脊髓损伤:由于外界直接或间接因素导致脊髓损伤,在损害的相应节段出现各种运动、感觉和括约肌功能障碍、肌张力异常及病理反射等相应改变。大鼠脊髓损伤模型是模拟人体脊髓损伤的基础模型,该研究采用人尿源性干细胞干预动物脊髓损伤模型,探索人尿源性干细胞对于神经修复的作用。

背景:人尿源性干细胞是近年来新发现的成体干细胞,其来源不受限制,提取简便,具备良好的增殖能力及多向分化潜能,近年来已应用于泌尿系疾病中的神经功能修复,如应激性尿失禁以及膀胱输尿管返流等。

目的:探索人尿源性干细胞向神经元样细胞诱导分化能力及对大鼠脊髓损伤的修复作用。

方法:体外获取人尿源性干细胞后利用流式细胞仪检测其细胞表型,将人尿源性干细胞向神经元样细胞诱导后进行免疫组织化学染色鉴定。采用Allen方法制作大鼠T9节段脊髓损伤模型,24只SD大鼠被随机分为2组:脊髓损伤组和人尿源性干细胞组,每组12只。人尿源性干细胞组在脊髓损伤后第1天于损伤脊髓边缘注入2 μL细胞浓度为1.0×1011 L-1人尿源性干细胞,脊髓损伤组注入等量含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养液,于造模后第1,10,20,30天进行BBB评分,第30天取各组损伤脊髓组织分别进行Luxol Fast Blue染色、小胶质细胞/巨噬细胞染色和胶质纤维酸性蛋白染色,并计算损伤脊髓面积和胶质纤维酸性蛋白荧光强度。

结果与结论:①人尿源性干细胞高表达CD29、CD90,而低表达CD45,并且在体外可向神经元样细胞诱导分化;②造模后第1,10天两组大鼠BBB评分差异无显著性意义(P > 0.05),第20,30天人尿源性干细胞组BBB评分明显高于脊髓损伤组(P < 0.05);③人尿源性干细胞组脊髓损伤面积明显低于脊髓损伤组(P < 0.05),胶质纤维酸性蛋白染色显示人尿源性干细胞组荧光强度明显低于脊髓损伤组(P < 0.05);④结果表明,人尿源性干细胞能向神经元样细胞分化,并对大鼠脊髓损伤具有修复作用。

ORCID: 0000-0002-4704-2975(邓明)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程

关键词: 脊髓损伤, 人尿源性干细胞, 神经修复, BBB评分, 胶质纤维酸性蛋白, 国家自然科学基金

文章来源: 邓 明, 谢 萍, 吴 飞, 马永刚, 周 炎, 陈 庆, 刘世清, 明江华. 人尿源性干细胞体外向神经元样细胞诱导分化及对大鼠脊髓损伤的保护作用[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(1): 93-98.


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