富田興合苑業主的大事小事62、新型冠狀病毒62：革蘭氏染色反應，鹼性染料結晶，媒染
革蘭氏染色反應：是細菌分類和鑑定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師Gram創立的。細菌先經鹼性染料結晶染色，而經碘液媒染後，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（用“G+”表示，“G+”讀做“革加”或“革陽”），後者為革蘭氏陰性菌（用“G-”表示，“G-”讀做“革減”或“革陰”）。為觀察方便，脫色後再用一種紅色染料（如鹼性蕃紅等）進行復染。陽性菌仍帶藍紫色，陰性菌則被染上紅色。
革蘭氏染色法（Gram stain）能觀察到細菌的形態…
…鹼（無機化合物）：在酸鹼電離理論中，鹼指在水溶液中電離出的陰離子全部都是OH-（氫氧根）的物質；在酸鹼電子理論中，鹼指電子給予體（化學反應中失去電子的一方）…
…鹼性：一種物質在溶劑中向其它物質提供未共用電子對（電子；負電荷）的能力…
…染：形聲。從水，雜聲。一說從木、從水、從九。會意。古染料多來源於植物，故從木；染料須加工成液體，故從水；染須反覆進行，故從九。本義：使布帛等物著色…
…料：會意。從鬥，從米，表示用斗量米。本義：稱量…
…料2：材料；原料：木～。燃～。布～。加～。資～。他就是這麼塊～…
…染料：指能使其他物質獲得鮮明而牢固色澤的一類有機化合物，由於現在使用的顏料都是人工合成的，所以也稱為合成染料。染料和顏料一般都是自身有顏色，並能以分子狀態或分散狀態使其他物質獲得鮮明和牢固色澤的化合物（百度百科）；直接或經媒染劑作用而能附著在纖維和其他材料上的有色物質，有的可以跟被染物質化合。種類很多，以有機化合物為主（百度漢語）…
…結（jiē）：長出（果實或種子）…
…晶：會意字。甲骨文字形，從三日，表示光亮之意。本義：光亮，明亮…
（…會意：造字法之一。會意是說字的整體的意義由部分的意義合成，如“信”字。“人言為信”，“信”字由“人”字和“言”字合成，表示人說的話有信用…）
…晶2：1.光亮：～瑩。亮～～。2.水晶：茶～。墨～。3.指晶體：結～…
…結晶：熱的飽和溶液冷卻後溶質因溶解度降低導致溶液過飽和，從而溶質以晶體的形式析出，這一過程叫結晶。
晶體，即原子、離子或分子按一定的空間次序排列而形成的固體…
…媒：形聲。從女，某聲。本義：婚姻介紹人，媒人…
…媒染：利用載體使對纖維沒有親和力的染料色素染上纖維。這種載體稱媒染劑。我國古代常用的媒染劑有白礬[茜（qiàn）草染紅]和涅（礦物染黑）等…
…礬（fán）：某些金屬硫酸鹽的含水複鹽結晶，如明礬、膽礬、綠礬。明礬也叫“白礬”，帶澀味，呈酸性反應，可供造紙、製革及制顏料、染料等用…
[…硫酸：無機酸，化學式H2SO4。強酸性。純品為無色油狀液體，具有強烈的吸水性和腐蝕性，有氧化性。能損傷衣物、皮膚。在配製溶液時，切忌加水入酸，必須將酸緩滴入水中。廣泛用於石油、化工、冶金等工業中…
…鹽：1.電離時生成金屬陽離子（或其他陽離子）和酸根陰離子。通常是由金屬陽離子和酸根陰離子結合的化合物。如硝酸鈉（NaNO3）、硫酸銨［（NH4）2SO4］等。2.食鹽的通稱…
…複鹽：見《富田興合苑業主的大事小事51》…]
…涅（niè）：形聲。從水，從土，曰聲。本義：可做黑色染料的礬石…
[…形聲：一種造字法…是說字由“形”和“聲”兩部分合成，形旁和全字的意義有關，聲旁和全字的讀音有關。如由形旁“氵（水）”和聲旁“工、可”分別合成“江、河”…]
…媒染：以化學品處理某物，從而給予後者以與染料結合的能力…
格蘭氏染色中碘液的作用？——網友提問
格蘭氏染色流程可概括為：染色-脫色-復染。
第一步初染劑（Primary Stain）：使用結晶紫染色。
第二步媒染劑（Mordant）：加入複方碘溶液或稱革蘭氏碘液（Gram's Iodine）後會形成不溶性的結晶紫-碘（CV-I）複合體。細菌呈紫黑色。
第二步是關鍵，它的目的是分辨細菌的革蘭氏染色特性。
若為革蘭氏陽性菌，此複合體繫結合於細胞壁之鎂、核糖核酸組成（Magnesium Ribonucletic Acid），形成鎂-核糖核酸-結晶紫-碘（Mg-RNA-CV-I）複合體，不易脫去。
（…碘：非金屬元素，符號I，原子序數53，最外層電子數7…）
第三步脫色劑（Decoloring Agent）：使用酒精（95%）脫色，試劑具脂溶劑（Lipid Solvent）和蛋白脫水劑（Protein Dehydrating Agent）之雙重功能。此步驟對革蘭氏陽性細菌無效，因為細胞壁上厚厚的細胞壁層阻隔了結晶紫-碘複合體的外滲，只能留在細菌體內。革蘭氏陰性菌細胞壁層薄，會被脫色而成為無色。
第四步復染劑（Counterstain）：為了對比，在此之後會加入番紅（Safranin）進行復染，革蘭氏陰性菌成紅色，而革蘭氏陽性菌仍保有原來的紫色。（優質解答）
革蘭氏染色的關鍵步驟是碘液媒染還是酒精脫色？——網友提問
“都重要啊，酒精脫色不好會假陽性，碘液煤染不好的話結晶紫結合不好吧…”網友“李雲龍（備註是‘微生物學博士’）”說。
“革蘭氏染色四大基本步驟：
結晶紫初染
碘液媒染
乙醇脫色
沙黃復染
其中乙醇脫色是關鍵
因為如果脫色過度，有可能會使革蘭氏陰性菌呈假陰性
如果脫色不夠，有可能使革蘭氏陰性菌呈假陽性…”知乎網友說。
“這個實驗出現假陽性主要是由於脫色不完全，可能是由於塗片過厚，或者是結晶紫染色過度，導致脫色不完全。
假陰性可能是因為細胞固定過度，造成細胞壁通透性的改變，而出現假陰性結果；細胞培養時間太長，可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶，也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。
因此染色、脫色、固定等步驟的時間控制比較重要，需要對比試驗，得出最適時間…”網友“一粒沙（備註是‘一粒做實驗的沙子’）”說。
“革蘭氏染色實驗中，微生物固定後是死了，還是活著？——網友提問
“當然是死了，”網友“鬼哥1231”說，“製作圖片的時候因為要固定，玻片會經過酒精燈外焰，那有幾百度。再厲害的生物在這個溫度下也難逃一死…”
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若不知曉歷史，便看不清未來
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