02.27 大腸桿菌O157計數培養基（膜過濾法）

大腸桿菌O157計數培養基（膜過濾法）

Hicrome™ M- Modified EC0157:H7 Selective Agar Base

用途 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

推薦用於薄膜過濾法初步計數食品中大腸桿菌O157:H7

原理

該培養基推薦用於從肉、禽、奶、嬰兒配方乳等食品中分離大腸桿菌O157:H7[1],[2]。它基於三種生化反應（酶）進行鑑別——葡萄糖醛酸酶、山梨醇發酵和賴氨酸脫羧酶[4]，大腸桿菌O157為(-)(-)(+)。

培養基中的細菌會先發酵葡萄糖。葡萄糖耗竭後發酵山梨醇，導致pH值下降（酚紅為指示劑），使菌落呈黃色。培養基還含有β葡萄糖醛酸酶的顯色底物，使菌落為藍色。對於山梨醇發酵（+）菌或賴氨酸（-）菌，其菌落中的藍色和黃色疊加為綠色。培養基中有賴氨酸，使賴氨酸脫羧酶陽性菌代謝後使pH值升高，產生粉色菌落。抑制劑中的莫能菌素抑制革蘭陽性菌，在44-44.5℃孵育可抑制革蘭陰性菌，

該培養基也用於食品中的大腸桿菌計數[3]。

培養基成分

組成g/L

動物組織酶解物5.000

酵母粉3.000

氯化鈉5.000

賴氨酸10.000

山梨醇20.000

葡萄糖2.500

硫酸鎂1.500

脫氧膽酸鈉0.150

葡萄糖醛酸鈉0.500

酚紅0.120

顯色混合劑0.050

瓊脂15.000

最終pH (25°C) 7.2±0.2

配製

62.82g重懸於1000ml蒸餾水，加熱至沸騰使完全溶解。請勿高壓滅菌。冷卻至45-50°C，無菌加入1管添加劑（貨號：FD295），混勻並傾注平板。

加入添加劑（貨號：FD295）後，44-44.5°C培養18-24小時，結果如下：

大腸桿菌——綠色

大腸桿菌O157:H7——粉色

肺炎克雷伯菌——黃色

脫氧膽酸鈉和添加劑增加選擇性——革蘭氏陽性菌被抑制

參考文獻

1.Entis, P.,and I. Lerner.1997. 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 60:883-890.

2.Entis, P.1998. Direct 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the hydrophobic grid membrane filter,followed by serological confirmation : collaborative study.J.AOAC Int. 81:403-418.

3.Entis, P., and I.Lerner. 1998. Enumeration of #-glucuronidase positive E.coli in foods by using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 61:913-916.

4.Corry J.E.L, Curtis G.D.W., Baird R.M., Culture Media for Food Microbiology, Progress in Industrial Microbiology, Volume 37.

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關鍵字: 膜過濾 大腸桿菌 培養基