支原體PCR驗證用標準品,認準MB產品

支原體PCR方法在國際上已得到歐洲、日本和美國藥典的承認,它可以取代支原體經典藥典方法(如培養法、DNA染色法),但前提是方法需要進行驗證。在這方面,國內藥典尚無明確說明,但相關權威機構在一些不同場合和法規指南中表示,將逐步與國際接軌,如果核酸法經過驗證,保證其足夠的靈敏度、特異性和耐用性,則也認可。


國內尚不能大規模推廣核酸法主要有兩個瓶頸:一是國內缺乏參比標準品。而且支原體最好是滅活的,級別至少有10CFU,如果再有100CFU則更好。二是企業仍需要用自己的樣本基質進行PCR的方法學驗證,這樣增加了一定的難度。另外,支原體的DNA抽提也是一個必要的過程,難以統一化。


支原體PCR驗證用標準品,認準MB產品

事實上,對支原體PCR或qPCR方法進行驗證,除了可參考試劑盒生產廠家自身的驗證外(儘管它不能完全替代用戶自己的驗證,但可提供特異性驗證的一些信息,如使用哺乳動物細胞DNA、某些細菌菌屬DNA等,而不必使用者自己再去嘗試),用戶自己主要是對方法的檢測限和耐用性進行驗證,這裡最常用的就是10CFU支原體標準品。100CFU標準品可作為一個補充。


德國MB廠家集20多年支原體防控檢測領域的經驗,開發有一系列的相關產品,包括支原體核酸法驗證用標準品。其10CFU標準品為滅活支原體凍乾粉形式,經精確標定。所用支原體培養基符合歐洲醫藥管理局標準。支原體為滅活形式,不會帶來汙染,同時凍乾粉又保證了產品的穩定性,不會受溫度波動的影響。


每批支原體都會提供CFU與基因拷貝數的比值,以方便二者的換算。因為10CFU只能確定PCR能夠達到的檢測限在10CFU以下,但無法具體確定靈敏度的數值。帶DNA拷貝數標定的基因組DNA標準品則可進一步確定檢測限的數值。而且核酸法最終檢測的對象是核酸,而產品的QC主要關注的是支原體,核酸的存在是側面反映支原體存在的一個指標。CFU與基因拷貝數的比值很好地對二者進行了關聯。


MB的支原體標準品批次均經廠家QC合格後方能出廠,包括其Ct值達到一定要求。另需注意的是,100CFU標準品不能按倍數稀釋為10CFU標準品。因支原體在液相中不是均一分佈,而大多呈集聚狀態。因此按倍數稀釋後,會造成支原體量上的偏差。


德國MB的支原體菌株來自英國菌種保藏中心(NCTC),均有ATCC編號。支原體傳代次數少,發生突變幾率低。而且經國際廣泛引用和認可,部分如下:


支原體PCR驗證用標準品,認準MB產品

支原體PCR驗證用標準品,認準MB產品

支原體PCR驗證用標準品,認準MB產品

如果您對MB的支原體標準品想訂購或進一步瞭解,可聯繫中國區代理商上海威正翔禹生物公司或北京締一生物公司。


分享到:


相關文章: