撰文 | 章台柳
目前，肿瘤免疫疗法主要聚焦在增强T细胞的细胞杀伤作用，ICB（immune checkpoint blockade）靶向抑制性通路，CAR-T靶向激活性通路。BiTEs（bispecific T cell engagers）是一种可以双向特异性识别肿瘤抗原和CTL细胞受体（如CD3）的抗体，促使内源效应T细胞和肿瘤细胞相互作用，诱导T细胞活化，杀伤肿瘤细胞【1】。BiTEs促进T细胞/靶细胞结合并不依赖于MHC。CD3-CD19 BiTEs已成功用于治疗CD19+ B-ALL【2】。和CAR-T疗法一样，BiTEs治疗通常导致毒性，而且对于实体瘤的治疗效果不佳。
NK细胞（natural killer）具有杀伤功能，促进抗肿瘤作用。NK细胞表达多种激活受体，如CD16、NKG2D、SLAM家族、NCR家族NKp30、NKp44和NKp46，是潜在的靶点用于诱导NK细胞介导抗肿瘤免疫。那么靶向激活NK细胞的多功能抗体是否能提高抗肿瘤免疫，是否能改善毒性，目前还没有报道。
近期，来自法国的Eric Vivier和Laurent Gauthier团队在Cell上发表了题为Multifunctional Natural Killer Cell Engagers Targeting NKp46 Trigger Protective Tumor Immunity的文章，报道了靶向NK活化受体NKp46、CD16和肿瘤抗原的三功能nature killer cell engagers （NKCEs），可激活NK细胞，控制实体瘤和侵袭肿瘤的生长，并且具有类似于IgG抗体的药代动力学，没有脱靶效应。三功能的NKCEs为肿瘤治疗提供了新的思路。
研究团队首先检测肿瘤中NK细胞的激活受体的表达情况，在人结肠癌、头颈癌、肾癌、肺癌、胰腺癌、胃癌等实体瘤中均出现NKp46+淋巴细胞。在急性髓系白血病、乳腺癌和肺癌中有报道NKp46持续性表达，并下调NKG2D、NKp30、NKp44等激活受体。同时，多种肿瘤中和外周血液中NKp46的表达没有明显差异，这使得NKp46可以作为靶点，用来激活肿瘤中NK细胞的抗肿瘤免疫。将可溶性人源NKp46-Fc作为抗原用于免疫小鼠，经筛选后产生和NKp46胞外段不同部分结合的14种anti-NKp46单抗。
其次，研究人员利用single-chain variable fragment（scFV）技术将anti-NKp46的Fab段和识别肿瘤抗原的部分相连制成bispecific NKCE。三种针对NKp46不同部位的NKCEs均能够上调脱颗粒标志物CD107、活化标志物CD69，激活NK细胞，并促进裂解肿瘤细胞，效果优于肿瘤抗原单抗。经过进一步的优化设计，得到NKCE-1形式，不仅具有相当的NK激活能力及抗肿瘤效果，而且在体内具有IgG1类似的药代动力学特性，和FcRn结合的高亲和力，半衰期长达11天。随后，研究人员制作了NKp46/(Fc)/CD20-NKCE-1，并使用CD20+ Raji lymphoma B细胞建立实体瘤模型检测其抗肿瘤效果。NKp46/(Fc)/CD20-NKCE-1显著降低实体瘤的生长速度，控制肿瘤大小；同时促进肿瘤中NK细胞的浸润或者增殖。
最后，研究团队将CD16介导的ADCC（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity）通路和NKp46进行联合，制作能同时靶向NKp46、CD16、肿瘤抗原的三功能（trifunctional）NKCEs，进一步提升NKCEs的抗肿瘤能力。添加CD16后显著增加NKCEs的肿瘤细胞裂解能力和NK细胞激活能力，同时优化CD16的Fc受体结合能力进一步提升NKCEs的抗肿瘤功能。活体实验表明，bispecific NKCEs或trifunctional NKCEs用于治疗实体瘤或者侵袭性肿瘤时，显著降低肿瘤大小，控制肿瘤生长，而且三功能 NKCEs的抗肿瘤效果优于肿瘤抗原特异性单抗，具有潜在的临床开发价值。
总之，受启发于BiTEs技术，文章开发了针对NK细胞激活的多功能抗体技术NKCEs，同时靶向NKp46、CD16、肿瘤抗原，增加肿瘤中NK细胞数目，促进NK细胞激活和ADCC，提升抗肿瘤免疫。为开发下一代肿瘤免疫治疗分子NKCE提供了重要参考。
原文链接：
https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.04.041
制版人：珂
参考文献
1. Slaney, C.Y., Wang, P., Darcy, P.K. & Kershaw, M.H. CARs versus BiTEs: A Comparison between T Cell-Redirection Strategies for Cancer Treatment. Cancer Discov 8, 924-934 (2018).
2. Spiess, C., Zhai, Q. & Carter, P.J. Alternative molecular formats and therapeutic applications for bispecific antibodies. Mol Immunol 67, 95-106 (2015).
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