MET基因介紹
肺癌是全世界最常見的癌症類型，全球每年新發200萬例左右。同時，肺癌也是癌症相關死亡的主要原因，全世界每年有170萬例死亡病例。包括MET ex14跳躍改變、MET擴增以及MET蛋白過度表達在內的MET信號通路改變發生在3％-5％的NSCLC病例中。
2007年MET擴增被發現，如今已然成為EGFR-TKI的重要耐藥機制之一，c-Met通路在非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）中的研究也逐漸成為一個熱點。MET基因位於人類7號染色體長臂（7q21-31），長度約125 kb，同時含有21個外顯子。c-MET是MET基因編碼產生的具有自主磷酸化活性的跨膜受體，屬於酪氨酸激酶受體（receptor tyrosine kinases, RTKs）超家族，主要表達於上皮細胞。HGF是目前發現的c-MET的唯一配體，屬於纖維蛋白溶酶原家族，主要表達於間質細胞，亦可表達於腫瘤細胞而通過自分泌機制發揮作用。HGF與c-MET的Sema域結合使c-MET發生二聚、酪氨酸磷酸化，繼而激活眾多下游信號通路，如PI3K-Akt、Ras-MAPK、STAT和Wnt/β-catenin等，從而發揮其促細胞增殖、細胞生長、細胞遷移、侵襲血管及血管生成等效應，在組織正常發育和腫瘤進展中發揮關鍵作用。
MET基因結構（紅色框（編碼細胞外結構域的外顯子），藍色框（編碼細胞內部分的序列）和綠色框（編碼跨膜結
MET基因與NSCLC
c-MET是一種原癌基因，也是多種癌症的驅動基因之一。c-MET激活方式有點突變、擴增、蛋白過表達和重排四種類型，其中重排被認為是一種新的致癌方式。2015年ASCO大會上報道了關於c-MET基因突變的研究，指出它在肺腺癌中發生率為3%，其最常見的變異類型是外顯子14的供體位點剪接突變。
MET基因變異示意圖
目前臨床病理特徵的研究顯示，MET 14外顯子跳躍突變於NSCLC中以肺肉瘤樣癌和腺癌最為多見。
研究發現HGF/c-Met信號通路異常激活與吉非替尼、厄洛替尼等小分子EGFR-TKI耐藥有關。HGF/c-Met信號通路的異常激活，主要機制涉及HGF及相應受體c-Met過表達、c-Met基因擴增和c-Met基因突變。其中，HGF過表達和c-Met基因擴增為其主要原因。c-MET擴增在一線初治時突變頻率約2~4%，二線耐藥時MET擴增約在4~10%左右，在奧希替尼二線治療的耐藥機制約中佔20%，奧希替尼一線治療中MET擴增是最常見耐藥機制約佔15%。
非小細胞肺癌中MET擴增頻率
MET基因變異檢測方法
1）MET 14外顯子跳躍突變
MET 突變以14外顯子跳躍突變為主，且MET 14外顯子跳躍突變形式多樣，目前以DNA為基礎的NGS是最常用檢測技術。目前國內批准的肺癌診斷的NGS試劑盒逐漸增多，其中還只有艾德生物的試劑盒是包含MET基因的檢測，其基於PCR方法的試劑盒可檢測14外顯子跳躍突變；基於 NGS的10基因試劑盒可以檢測13~14外顯子以及內含子，以及 Ex15~20。另外，MET 14外顯子跳躍突變常伴有免疫組化（immunohistochemistry, IHC）下的MET過表達。因此，也有研究者建議可以先用IHC對患者進行篩選，從而縮小目標人群。
2）MET擴增
MET擴增即MET拷貝數擴增，包括整體染色體重複和局部區域基因的重複。整體染色體重複即多倍體（polysomy），腫瘤細胞中出現多條7號染色體。通常使用熒光原位雜交技術（fluorescence in situ hybridization, FISH）檢測MET拷貝數擴增。FISH法可通過檢測MET位點和CEP7（作為對照）來判定MET基因拷貝數（MET gene copies number, MET GCN），其評估標準可依據兩個方面：①MET/CEP7的比值; ②每一個細胞的基因拷貝數量及其陽性細胞所佔總細胞比例。對於FISH診斷MET擴增還沒有統一的標準，常用的有Cappuzzo評價系統和PathVysion兩種方法。另外，隨著高通量測序大panel試劑盒的批准，MET擴增也可以用NGS的方法進行檢測。
檢測MET擴增
FISH檢測MET擴增的評價標準
NGS檢測MET擴增
在TATTON 1b 期的研究中，對於MET基因擴增的檢測方法主要有：
1，熒光原位雜交（FISH）：MET基因拷貝≥5 或 MET：EP7≥2；
2，NGS方法檢測：≥20％腫瘤細胞，≥200x測序覆蓋深度，≥1.8 Log2 比率，假設50％腫瘤分數；
3，免疫組織化學（IHC）：≥50％的腫瘤細胞是3+。
MET變異三種檢測方法的比較
3）MET蛋白過表達
IHC可用於檢測c-MET蛋白的過表達情況。MET IHC以抗-c-MET（SP44）兔單克隆抗體（#7904430, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ）為一抗，以抗-Rb OmniMap DAB（#760149, Ventana Medical Systems）為二抗，陽性標準以兩種不同的方法判定：①H-評分，這一評分根據樣本的染色強度（0-4）和陽性腫瘤細胞所佔細胞總數的比例（0-100%）而判定，其分數為0-400不等，只要H-評分大於200便可判定為陽性; ②將腫瘤細胞分為MET高表達和低表達兩類，其具體判定標準為：3+（≥50%的腫瘤細胞呈強陽性）; 2+（≥50%的腫瘤細胞呈陽性/弱陽性且
< 50%的腫瘤細胞呈強陽性）; 1+（≥50%的腫瘤細胞呈弱陽性且陽性細胞數 < 50%）; 0（無染色或任何強度染色的腫瘤細胞數均 < 50%）; 2+或3+被定義為MET高表達，0或1+被定義為MET低表達（Metmab標準）。有學者提出，由於在臨床上用IHC的方法檢測的是c-MET總蛋白的表達量，而MET蛋白只有在被異常激活以後才會通過激活下游通路在NSCLC的發生發展中起作用，故通過IHC的方法分析MET蛋白的磷酸化狀態比單純檢測MET蛋白表達量更適合選擇c-MET靶向治療的人群。所以在應用IHC方法時，需注意MET蛋白表達量界限的判定標準，並確定是否需要檢測其磷酸化的狀態; 另外，H-評分和Metmab標準在MET IHC中應用前景的比較也許需研究探討。
通過上述對基因突變、基因擴增和蛋白過表達三種相應檢測方法的描述，似乎可以看出檢測基因突變和基因擴增的特異性較蛋白表達更好，而IHC法靈敏度更高，對於最佳方法及其判定標準的選擇，還需進一步明確基因突變、擴增以及蛋白過表達之間的具體聯繫及其和腫瘤細胞生長的關係等等。
全球首個選擇性MET抑制劑獲批用於肺癌患者
2020年3月25日，默克公司宣佈日本厚生勞動省（MHLW）批准其靶向藥物Tepotinib上市銷售，用於治療不可切除、MET外顯子14（MET ex14）跳躍突變的晚期或複發性非小細胞肺癌（NSCLC）患者。
Tepotinib是全球首個獲批准用於治療晚期NSCLC MET ex14跳躍突變患者的MET抑制劑。
本次獲批基於正在進行的單臂II期VISION研究（NCT02864992）的數據。該研究共入組了99例NSCLC患者（包括15例日本患者），以上患者採用液體活檢（LBx）或組織活檢（TBx）檢測證實為攜帶MET ex14跳躍改變。
根據獨立評審委員會（IRC）評估，Tepotinib治療的客觀緩解率（ORR）為42.4%（95%CI 32.5-52.8）；在經LBx、TBx檢測的患者中，中位緩解持續時間（DOR）均為12.4個月[經LBx檢測：95%CI 8.4個月-不可評估（NE：not evaluable）；經TBx檢測：95%CI 9.7個月-NE]。
此外，在對130例患者的安全性分析中，Tepotinib具有良好的耐受性。在任何級別中，最常見的與治療相關不良事件（TRAE）是周圍水腫（53.8％）、噁心（23.8％）和腹瀉（20.8％）。TRAE導致11例患者永久性停藥（8.5％）。
Tepotinib分子式
Tepotinib是全球首個獲批的選擇性MET抑制劑
此前沒有單獨靶點的MET抑制劑上市，但有兩款多激酶包含c-MET靶點的抑制劑獲批，分別是克唑替尼（靶向ALK、ROS1、MET），和卡博替尼（抑制VEGFR2、RET、MET、Kit等至少9個靶點）。
諾華的Capmatinib和德國默克的Tepotinib，相繼在去年9月份獲得美國食品藥品監督管理局（FDA）授予的突破性療法，用於針對MET 14號外顯子跳躍突變的NSCLC患者的治療。本次Tepotinib在日本獲批，先下一城。
但在c-MET抑制跑道上的角逐才剛剛開始。同樣被FDA授予的突破性療法Capmatinib不容小覷，GEOMETRY mono -1 II期研究的結果顯示：一線、二線治療總體緩解率分別為67.9％和40.6％。並且，Capmatinib在一線治療中的平均DOR為11.14個月，二線治療為9.72個月。
我國也有多款在研MET抑制劑
我國研發的MET抑制劑包括和黃醫藥的沃利替尼、海和生物的谷美替尼、浦潤奧生物的伯瑞替尼、貝達藥業引進的EGFR/c-MET雙抗MCLA-129、江蘇豪森的HS-10241、恆瑞醫藥的c-MET ADC以及復宏漢霖的c-MET單抗HLX55等。隨著相關研究結果的公佈，未來將給NSCLC患者提供更多的治療選擇。
參考資料：
1.https://www.prnewswire.com/news-releases/tepmetko-tepotinib-approved-in-japan-for-advanced-nsclc-with-metex14-skipping-alterations-301029496.html
2.https://www.merckgroup.com/en/news/tepotinib-breakthrough-therapy-designation-11-09-2019.html
3.TEPMETKO (Tepotinib) Approved in Japan for Advanced NSCLC with METex14 Skipping Alterations
