1 ASF检测计划的制定
1.1 采样动物个体选择
首先，采样动物个体的选择，必须根据病毒学特征、病毒感染动物后的排毒情况、产生病毒血症的时间、是什么地方先有毒、耐受猪带毒情况等特点。
采样动物的选择，先来了解疫病的传播特点。这里举了3种病毒的例子，在一个同样的猪舍中，一个相同的有100头这样一个模式的感染群中，你可以发现如果是猪口蹄疫病毒，在相同的时间里面它的传播能力很强，可能所有的猪全部都会被感染，这样的话，如果你进行采样检测，可能随便闭着眼睛挑选一头猪都能够检测到病毒。但如果说是经典的猪瘟病毒，它的传播相对于猪口蹄疫来说会慢一些，但是其死亡率较高。而非洲猪瘟病毒的速度很慢，它可能只在有限的接触的范围内进行传播，但是，一旦感染，猪的死亡率非常高，几乎接近100%。
美国堪萨斯州立大学研究人员进行攻毒实验，通过水、饲料两种方式进行感染，发现通过水源感染的最低感染剂量，也就是感染1头猪被感染需要10^0 TCID50/毫升病毒粒子，而通过饲料方式进行感染，可能会需要它的10000倍，也就是10^4 TCID50/毫升。研究发现，饲料虽然单次最低感染剂量要求高，但多次暴露后感染风险显著升高。
国外的研究发现，直接接触感染ASFV的潜伏期是5～19天（21天），蜱叮咬感染潜伏期不超过5天。感染之后，可以发现在3天左右，可能就会在鼻腔中排毒，5天左右可以在血液中通过PCR方法检测到病毒，也就是这两个窗口期，决定了我们检测时是黄金期，还是白银期，还是最后时期？当已经出现临床症状的时候，可能已经大量排毒了，也就可能已经造成了一定的场内污染。
1.2 依据检测项目选择
根据需要检测的项目，是进行唾液的检测，还是进行血样、组织的检测？采集的样品是需要进行抗原检测，还是进行抗体检测？这些都需要进行采样的计划。
前期的一个研究报道发现耐过猪也是会带毒的，所以，排毒时间可能是30天左右或者更长，之后通过PCR方法检测不到，但是并不代表它的病毒血症没有了，并不代表这头猪完全就是安全的，有可能在它体内的组织脏器中还存在病毒。如果有应激，或者疫苗免疫、配种、冷热交替等刺激，它可能又开始出现病毒血症而且排毒。所以，通常情况下，耐过的猪仍然是一个定时炸弹，仍然有传播的风险。对于这种情况，可能需要选择检测抗体的方法。
检测时，需要知道不同样品在不同时间点的病毒含量。通过比对后发现，血液中在目前来看能够采集的样品中应该是病毒含量最高的，它可能在感染之后能达到10^6-8 HAD50/毫升，是用了格鲁吉亚的2007株，就是和我们国内一样的基因2型毒株做的实验。而鼻拭子排毒量低于血液，但鼻拭子出现病毒的时间会更早一些，同时它的排毒量高于肛拭子。所以，在检测过程中应该去检测鼻拭子或者唾液样品等来更早地发现疫情。
到底在临床中是应该检测抗原，还是检测抗体？一般情况下，处于潜伏期的3天或者是更早的时间内，如果是PCR敏感性再低一些的话，可能会延误诊断，造成大量的排毒，从而污染整个猪场。如果仅检测抗体，就有可能在7～12天之前并没有产生抗体，而有的猪可能在感染7～12天期间已经死亡了，也就是导致了漏检。如果仅检测抗原、不检测抗体，可能出现耐过猪被漏检的情况。所以，抗原、抗体同时检测才是最精准，特别是在引种或者不知道猪群背景的情况下进行检测，应该是抗原、抗体同时检测，能够做到万无一失。
1.3 采集样品频率
非洲猪瘟发生过程有哪些特点？有哪些高风险的应该多采样？都是需要考虑的问题，保证不漏采，也不会过于频繁，浪费资源。
1.4 采样数量（流行率和动物数量计算）
采样数量应该根据疾病的流行率和动物群体的整体特点、经济成本等决定。
1.5 样品运输
根据国外的一些经验，随着ASF的流行，可能会出现慢性病例，典型病例减少，和其他的疾病如猪蓝耳病、经典猪瘟以及一些细菌性感染等在临床症状上有相似的表现，这时候要进行分子生物学诊断，才能确诊。
2 ASF临床诊断排查
除了采样外，临床诊断排查在ASF的检测诊断中也是非常重要的环节。农业农村部也提出，通过临床症状的分析，能够作为诊断的重要依据。根据ASF的发病特点，当典型的急性或亚急性型发生的时候，可以观察到先有母猪流产、广泛性出血，然后有可能有大量的脏器的出血。同时，剖检后发现脾脏肿大或者变脆。这就说明可能离确诊已经非常近了，就是说疑似病例，是ASF的概率非常高。但很多时候如果出现这样的临床症状，那可能已经迟了，ASFV已经大量传播开来。所以要提高警惕，把检测的时间往前移，当猪出现食欲下降、减料甚至不采食或者发烧、不明原因死亡的时候，我们就应该提高警惕，在第一时间对猪进行检测。
（资料来源：本文摘自中国农业大学动物医学院副教授周磊老师，在2019年 “伊科拜克•猪兜讲坛” 第4期（总第32期）直播节目中分享的内容。根据节目视频整理，未经本人审阅，请以本人观点为准。未经允许，请勿转载。）
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