中文名：芽孢桿菌鑑定試劑盒
英文名：HiBacillus™ Identification Kit
品牌：Himedia
貨號：KB013
規格：5KT
用途：鑑定芽孢桿菌物種
概況
該試劑盒包含7種傳統生化檢查和5種糖發酵檢查。微生物的發酵反應，引起培養基顏色發生變化。
使用說明
待鑑定菌種應先進行分離和純化。可挑取一個菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯（M210）中，在35-37℃培養4-6小時，直到在620nm處，接種液濁度≥1.0OD。
無菌打開試劑盒，撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環劃線。在35℃-37℃孵育24-48小時。
結果判定
依據結果詮釋表。在第2孔和第5孔，在24-48小時孵育期結束後，分別添加如下試劑：
1.觸酶試驗：第6孔
用接種環刮取第1孔內表面，將接種環蘸到含3%H2O2的乾淨小試管中。
接種環表面冒泡為陽性。接種環表面沒有冒泡為陰性。
注意：3%的H2O2需新鮮配置。
2.硝酸鹽還原試驗：第5孔
加1-2滴對氨基苯磺酸（R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（R009）
立即出現粉紅色為陽性
顏色無變化為陰性
3.伏-普試驗：第2孔
加1-2滴Barritt試劑A(R029)和1-2滴Barritt試劑B（R030）
10分鐘內出現粉紅色為陽性
無顏色變化或有輕微變化為陰性。
4.糖發酵試驗：第8孔-第12孔
酸產生導致培養基顏色由紅變黃，為陽性反應。
如果仍保持紅色，則為陰性。
12種生化反應
1丙二酸利用試驗
2伏普試驗
3檸檬酸鹽利用試驗
4ONPG試驗
5硝酸鹽還原試驗
6觸酶試驗
7精氨酸脫羧試驗
8蔗糖發酵試驗
9甘露醇發酵試驗
10葡萄糖發酵試驗
11阿拉伯糖發酵試驗
12海藻糖發酵試驗
鑑定的芽孢桿菌物種
蠟樣芽孢桿菌（B.cereus）
短小芽胞桿菌（B.pumilis）
枯草芽孢桿菌（B.subtilis）
凝結芽孢桿菌（B. coagulans）
萎縮芽孢桿菌（B. atrophaeus）
巨大芽孢桿菌（B. megaterium）
蘇雲金芽孢桿菌（B. thuringensis）
儲存條件及保質期
2℃-8℃；12個月
引用文獻
DebajitBorah, R.N.S. Yadav. UV Treatment Increases Hydrocarbon DegradingPotential of Bacillus spp. Isolated from AutomobileEngines. American-Eurasian J. Agric. & Environ. Sci., 12 (6): 760-763,2012
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