徐州三中校址原为1938年日本人建立供旅徐日侨子弟读书的一所日本国民小学。抗战胜利后，颠沛辗转的江苏省立江苏学院曾先后于1946年和1948年两度迁至徐州此处办学。江苏省立江苏学院初建学院理事会，顾祝同为院长。全国人大副委员长费孝通，著名教授马寅初、周谷城、施蛰存，国际法专家周楠，著名社会学家王艮仲，合肥工业大学校长蔡秉人等曾在江苏学院任教、讲学。
1949年2月27日，经山东省人民政府批准，徐州市军营会文教部决定建立徐州市第三中学，由原来的“树德”、“建国”、“鼎铭”、“子扬”、“正德”等私立中学联合成立“山东省徐州市第三中学”，校址在原江苏学院旧址，张再铮任副校长并主持工作，实行初中、高中各三年的学制。同年4月，由临时合并的原建国中学和树德中学迁至现址，并隆重地补行了第一次开学典礼。
1953年，徐州归属江苏后，省主席谭震林任命肖德模为徐州市第三中学副校长。学校由原17个班、756人增至26个班、1410人。教师由原38人增至52人，兴建两幢学生宿舍楼。1999年9月,依托三中建立的民办初中--树人中学开始招生。2000年，初中部停止招生，成为完全高级中学。2011年9月，徐州三中、徐州市新盛建设发展投资有限公司联合举办的民办学校——“徐州市树人初级中学”成立。原徐州市树人中学的初中部被划入树人初级中学。2013年5月，徐州市第十中学由徐州三中托管，成立托管理事会。6月，“徐州三中实验学校”挂牌并开始招生。
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