前面給大家介紹了幾個常見的母牛發情鑑定方法，分別是外部觀察法、試情法以及陰道檢查法，現在給大家著重介紹下另外一種鑑定方法--直腸檢查法，直腸檢查法也是利用最廣，效率最高的檢查方法。所謂的直腸檢查法是將手臂伸入直腸內，隔著直腸壁檢查卵泡發育，成熟與排卵情況，判斷母牛發情程度。這種方法是目前應用廣泛且較為準確的發情鑑定技術，特別是對異常發情的母牛採用直腸檢查更為必要。
檢查方法
檢查前要將受檢母牛固定於固定架內（固定過程中要確保母牛不被傷害），然後將其尾巴拉向一側，使肛門充分露出。檢查人員要穿上工作服或紮上圍裙，手指甲應事先剪短磨光，手與臂部確保沖洗乾淨並塗以潤滑劑，一般用肥皂水即可。每檢查完一頭，必須要重新洗手臂和塗潤滑劑，最好用2%來蘇爾水將手臂進行一次消毒。
檢查時，檢查人員站在授檢母牛的後方，手指併攏呈錐狀，在肛門外輕輕旋轉，隨之慢慢插入肛門，將宿糞排出。在摸找卵巢時，掌心向下，手掌伸平，手指稍下彎，在骨盆底處下壓，並在骨盆左右、前後活動摸找較挺實的子宮頸管，再沿著子宮頸管的上面向前觸摸，即可摸到比子宮頸軟而彎曲的子宮角，兩子宮角之間的溝可明顯的感覺到。卵巢在子宮角下面或稍偏向其側下方，因此，在摸卵巢時，要沿著子宮角的大彎向下，並向兩側摸索。摸到卵巢後，可將手指再度彎曲，固定住卵巢，用手指肚在卵巢表面上輕輕滑壓，仔細感覺其狀態。
判定方法
在觸摸卵巢時，要注意有無卵泡發育及其發育程度，牛的卵泡發育雖然較小，但它突出於卵巢表面之上，所以比較容易觸摸的到。處於發情期的母牛，可以明顯的觸摸到突出於卵巢表面的卵泡，而排卵後便可觸摸到卵巢表面的凹陷狀態，黃體形成後可觸摸到卵巢表面質硬，形狀不整齊的凸塊。同時可觸摸子宮，母牛發情後其子宮頸稍微偏大、而且比較軟。但由於子宮粘膜有水腫現象，子宮角也隨之增大，子宮收縮反應比較明顯，子宮角堅實。不發情的母牛，子宮頸細而硬，而子宮較鬆弛，觸摸不那麼明顯，收縮反應差。根據母牛發情持續性短的特點，卵泡發育程度在臨床上可分為五個時期。
第一期：卵泡出現期。
卵巢稍微增大，卵泡在卵巢表面突出不明顯，觸摸是隻感覺是一軟化點，其直徑為0.5～0.7釐米。一般母牛在此期內即開始有發情表現，但也有一些母牛在發情表現前就有卵泡出現，本期維持6～12小時。
第二期：卵泡發育期。
卵泡增大到1～1.5釐米後，一般呈現圓形，比較明顯地突出於卵巢表面。觸摸卵泡時感覺有彈性，也有一定的波動感。母牛發情表現明顯，接受爬跨。此期維持8～12小時。
第三期：卵泡成熟期。
卵泡不再增大，泡壁變薄，緊張性增強，有一壓即破的感覺。母牛發情表現慢慢減弱，而後轉入平靜狀態，母牛拒絕爬跨。卵泡成熟期維持6～12小時左右，這也是人工授精的最佳時期。
第四期：排卵期。
在排卵期卵泡就開始破裂排卵，卵泡液流失，泡壁變的鬆軟，觸摸的時候感覺有一小凹陷。
第五期：黃體形成期。
在母牛排卵後6～8小時，黃體即開始形成。剛形成的黃體直徑約為0.6～0.8釐米，觸摸的感覺就像柔軟的鮮肉樣組織。完全成熟的黃體直徑約為2～2.5釐米，稍微有點硬且有彈性，突出於卵巢的表面。
檢查時注意事項
在直腸檢查時，手伸入肛門後，要緩慢向前伸入，不要用力過猛或極速前伸；在操作過程中，母牛發怒時，手在直腸內要暫時停止活動，待緩解後繼續操作，以防直腸損壞或破裂；摸找卵巢時要謹慎，不要粗暴地亂抓；觸摸卵巢時，要用手指肚輕輕地滑壓，感覺其狀態，不要用手尖觸及和用力擠捏。檢查時要做好記錄，對母牛發情的鑑定，在必要時，可採用多種方法檢查，綜合到位，尤其是對異常發情的母牛，如果是隱形發情和假髮情，僅僅根據外部觀察，往往會誤診，造成失配和誤配，產生經濟上的損失。
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