基因編輯真菌技術的形成與流程解讀


基因編輯真菌技術的形成與流程解讀


Red/ET重組系統是微生物基因編輯最經典的方法,可以實現對DNA分子的敲除、點突變、敲入等多種修飾。該技術已被廣泛地用於基因組DNA,如細菌人工染色體、大腸桿菌染色體等的遺傳修飾研究以及基因工程藥物的研究和開發中。但如何提高基因重組和編輯效率,一直是微生物基因編輯的研究熱點,直到CRISPR/Cas9技術的出現,給微生物基因編輯帶來一線曙光。

CRISPR/Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防禦,可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。近些年,由於CRISPR-Cas9基因編輯技術操作簡單,基因編輯效率高被廣泛應用,是目前用於基因編輯最前沿的方法。

CRISPR-B™是源井生物在基於Red/ET重組系統和CRISPR/Cas9基因編輯系統基礎上,通過自主研發優化基因編輯載體和基因編輯流程,在基因編輯效率和準確性均遠高於傳統方法的一項創新性技術。該技術可以廣泛應用於細菌和真菌的基因編輯。


CRISPR-B™技術優勢

基因編輯真菌技術的形成與流程解讀


源井生物利用CRISPR-B™技術對真菌進行基因編輯,可實現真菌的敲除,點突變或敲入。同時真菌的編輯可分為有痕及無痕的編輯方式。


CRISPR-B™技術可編輯的真菌(節選):

基因編輯真菌技術的形成與流程解讀


CRISPR-B™系列載體 > CRISPR-B _F > 包含有sgRNA、Cas9及篩選標記


技術流程

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質量控制標準:

1. 菌落PCR鑑定 2.靶位點測序鑑定



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