ANLN缺失後Hela細胞的力學特性與骨架蛋白變化分析

摘要:

ANLN缺失後Hela細胞的力學特性與骨架蛋白變化分析

文題釋義:

Anillin蛋白(ANLN):最早是以F-actin的綁定蛋白被發現的,後經研究表明其與細胞骨架的肌動蛋白纖維和肌球蛋白等主要組分相互作用,是一種高度保守的腳手架蛋白,在胞質分裂中穩定收縮環。在細胞分裂間期中維持正常的細胞-細胞連接和細胞形態。

原子力顯微鏡:利用探針與測量樣本之間的各種相互作用力,再通過激光束反射放大微懸臂形變的信號,能夠以極高分辨率(納米級)檢測樣本表面併成像,同時可對樣本進行力學性能測試,獲得樣本表面特定點的力-距離曲線,再通過對曲線分析獲得精確的力學特性,是近期運用最為廣泛的工具之一。

背景:目前關於ANLN蛋白在細胞分裂間期調節細胞形態、細胞-細胞間接完整性以及胞質分裂中穩定收縮環的作用已經明確,但其對細胞力學性能和骨架蛋白的影響還鮮有報道。

目的:探討ANLN缺失對分裂間期細胞力學特性與骨架蛋白的影響。

方法:通過原子力顯微鏡分別測量正常Hela細胞與siRNA敲降ANLN的Hela細胞的表面彈性模量和破膜力;採用激光共聚焦顯微鏡觀察正常Hela細胞與siRNA敲降ANLN的Hela細胞的肌球蛋白ⅡA以及肌動蛋白纖維分佈特徵。

結果與結論:①敲降ANLN的Hela細胞的表面彈性模量明顯高於未經處理的正常Hela細胞,與敲降ANLN的細胞相比,正常細胞的表面彈性模量更傾向於極性分佈(兩極間逐步降低),但兩組細胞長軸邊緣區域的破膜力並沒有明顯差別;②ANLN敲降組細胞在邊緣位置有較低的肌球蛋白ⅡA分佈;③ANLN敲降組近底層細胞-細胞連接區域的肌動蛋白纖維趨向更散亂,並且細胞內纖維束沿長軸排列不明顯,中層有細胞間隙變大的傾向;④結果說明,敲降ANLN對細胞的邊緣區域影響最大,ANLN的缺失會導致細胞邊緣區域更頻繁的重構,細胞需要聚集更多的骨架蛋白及其結合蛋白來穩定細胞狀態,導致了更高的表面彈性模量。

ORCID: 0000-0002-3501-4467(徐麗萌)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:幹細胞;骨髓幹細胞;造血幹細胞;脂肪幹細胞;腫瘤幹細胞;胚胎幹細胞;臍帶臍血幹細胞;幹細胞誘導;幹細胞分化;組織工程

關鍵詞: ANLN蛋白, 細胞鋪展, 原子力顯微鏡, 力曲線, 表面彈性模量, 破膜力, 細胞骨架, 肌動蛋白纖維, 國家自然科學基金

文章來源: 徐麗萌, 羅文宇, 張書偉, 王 立. ANLN缺失後Hela細胞的力學特性與骨架蛋白變化分析[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(1): 87-92.


分享到:


相關文章: