2019年12月，在中國武漢，出現了一種由先前未知的病原體引起的新型肺炎。 最初的病例與武漢市海鮮市場的暴露有關。該病原體很快被鑑定為新型冠狀病毒（2019-nCoV），與嚴重急性呼吸系統綜合症冠狀病毒（SARS-CoV）密切相關。目前，尚無針對這種新病毒的特異性治療方法。因此，迫切需要找到有效的抗病毒藥物來對抗這種疾病。
2020年2月4日，中科院武漢病毒所肖庚富，胡志紅及軍事醫學科學院毒物藥物研究所鍾武共同通訊在Cell Research 在線發表題為“Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro”的研究論文，該研究發現Remdesivir和氯喹在體外控制2019-nCoV感染方面非常有效。由於這些化合物已用於具有安全跟蹤記錄的人類患者，並且顯示出對各種疾病的有效效果，因此研究人員建議應在患有新型冠狀病毒疾病的人類患者中對它們進行評估。
2019年12月，在中國武漢，出現了一種由先前未知的病原體引起的新型肺炎。最初的病例與武漢市海鮮市場的暴露有關。截至2020年1月27日，中國當局報告在中國大陸確診2835例病例，包括81例死亡。此外，在香港，澳門和臺灣發現了19例確診病例，在泰國，日本，韓國，美國，越南，新加坡，尼泊爾，法國，澳大利亞和加拿大發現了39例病例。該病原體很快被鑑定為新型冠狀病毒（2019-nCoV），與嚴重急性呼吸系統綜合症冠狀病毒（SARS-CoV）密切相關。目前，尚無針對這種新病毒的特異性治療方法。因此，迫切需要找到有效的抗病毒藥物來對抗這種疾病。
藥物發現的有效方法是測試現有的抗病毒藥物是否有效治療相關的病毒感染。 2019-nCoV屬於Betacoronavirus，也包含SARS-CoV和中東呼吸綜合徵CoV（MERS-CoV）。 SARS或MERS患者使用了幾種藥物，例如利巴韋林，干擾素，洛匹那韋-利托那韋，皮質類固醇，儘管某些藥物的療效尚存爭議。在這項研究中，
研究人員評估了五種FAD批准藥物的抗病毒藥物包括利巴韋林，噴昔洛韋，硝唑尼特，那法莫司他，氯喹和兩種針對2019-nCoV臨床分離株的廣譜抗病毒藥物瑞地昔韋（GS-5734）和法維拉韋（T-705）。進行標準測定以測量這些化合物對2019-nCoV的細胞毒性，病毒產量和感染率的影響。首先，通過CCK8分析確定候選化合物在Vero E6細胞（ATCC-1586）中的細胞毒性。然後，在不同濃度的測試藥物存在下，以0.05的感染複數（MOI）用nCoV-2019 BetaCoV / Wuhan / WIV04 / 20192感染Vero E6細胞，在對照中使用DMSO。通過定量實時RT-PCR（qRT-PCR）定量細胞上清液中的病毒拷貝數來評估療效，並在感染後（pi）48h通過免疫熒光顯微鏡通過可視化病毒核蛋白（NP）的表達進行確認（細胞病變）。
在這7種受試藥物中，高濃度的三種核苷類似物包括利巴韋林（半數最大有效濃度（EC50）= 109.50μM，半細胞毒性濃度（CC50）> 400μM，選擇性指數（SI）> 3.65），噴昔洛韋（EC50為了減少病毒感染，需要=95.96μM，CC50 ＝>400μM，SI +> 4.17）和favipiravir（EC50 ＝61.88μM，CC50>400μM，SI +> 6.46）。然而，儘管依維拉韋在Vero E6細胞中的EC50值高達67μM，但已顯示出100％的有效保護小鼠抵抗埃博拉病毒攻擊的能力，表明建議進行進一步的體內研究以評估這種抗病毒核苷。
Nafamostat是一種有效的MERS-CoV抑制劑，可防止膜融合，可抑制2019-nCoV感染（EC50 = 22.50µM，CC50> 100µM，SI> 4.44）。硝唑尼特（Nitazoxanide）是一種具有商業潛力的原生動物藥物，可對包括人和動物冠狀病毒在內的多種病毒具有抗病毒潛力，可在低微摩爾濃度下抑制2019-nCoV（EC50 = 2.12μM; CC50> 35.53μM; SI> 16.76）。建議對該藥物針對2019-nCoV感染進行進一步的體內評估。值得注意的是，兩種化合物瑞德斯韋（EC50 =0.77μm; CC50>100μM; SI> 129.87）和氯喹（EC50 =1.13μM; CC50>100μM，SI> 88.50）在低微摩爾濃度下有效地阻斷了病毒感染並顯示出高SI 。
瑞姆斯韋及氯喹作用效果
Remdesivir最近被公認為是針對培養細胞，小鼠和非人類靈長類動物（NHP）模型中的多種RNA病毒（包括SARS / MERS-CoV）感染的有前途的抗病毒藥物。目前正在臨床研究中，用於治療埃博拉病毒感染。Remdesivir是一種腺苷類似物，可整合到新生的病毒RNA鏈中並導致過早終止。分析表明remdesivir在一個階段起作用（病毒進入後），與其作為核苷酸類似物的推定抗病毒機制相符。結果表明，在NHP模型中，靜脈內施用10μmg/ kg劑量的瑞德昔韋可導致其活性形式在血液中持續存在水平（10μm），並提供100％的埃博拉病毒感染防護。數據表明，EC90值在Vero E6細胞中針對2019-nCoV的瑞德昔韋為1.76μm，表明在NHP中可能達到其工作濃度。另外該研究表明，瑞德昔韋還可以有效抑制人細胞系（人肝癌Huh-7細胞）中的病毒感染。
氯喹是一種廣泛使用的抗瘧疾和自身免疫性疾病藥物，最近被報道為潛在的廣譜抗病毒藥物。 氯喹通過增加病毒/細胞融合所需的內體pH來阻斷病毒感染。加藥時間分析表明，氯喹在Vero E6細胞中在2019-nCoV感染的進入和進入後階段均起作用。除了其抗病毒活性外，氯喹還具有免疫調節活性，可在體內協同增強其抗病毒作用。口服後，氯喹廣泛分佈於整個身體，包括肺。氯喹對Vero E6細胞中2019-nCoV的EC90值為6.90μM，這是臨床上可實現的。氯喹是一種便宜且安全的使用了70多年的藥物，因此，它可能在臨床上適用於2019-nCoV。
該研究表明，Remdesivir和氯喹在體外控制2019-nCoV感染方面非常有效。由於這些化合物已用於具有安全跟蹤記錄的人類患者，並且顯示出對各種疾病的有效效果，因此研究人員建議應在患有新型冠狀病毒疾病的人類患者中對它們進行評估。
參考消息：
https://www.nature.com/articles/s41422-020-0282-0
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