免疫羊驼制备单域抗体
单域抗体的获得现在普遍通过免疫羊驼并通过羊驼体内自身的抗体成熟阶段来得到抗体基因，然后通过噬菌体展示筛选技术来从羊驼抗体库中筛选得到最适合的抗体序列。整个流程主要包括羊驼免疫、噬菌体文库构建和抗体筛选三个阶段。
羊驼免疫的推荐流程：
1.准备抗原：一只羊驼可以同时免疫1-5个抗原，每次免疫总的抗原量保持在1-2mg之间，体积在2mL以下，将抗原和佐剂1：1乳化使其形成均匀混合物，4°保存。
2.免疫羊驼：挑选好羊驼并确保动物适合，记录耳号后开始免疫实验。每次在羊驼颈部淋巴结附近分左右两侧注射，每侧分2点注射，每点注射0.4mL混合好的抗原。免疫后观察半小时确认羊驼状态良好，无不适症状。每2周免疫一次，一共进行7次免疫。
3.采血：在第6、7次免疫后间隔5-7天进行采血，采血从羊驼颈部静脉采取，每次取25 - 30mL血液，分3个采血管收集。
4.血清分离：在第4、5、6次免疫前进行采血用于免疫评价，采血从羊驼颈部静脉采取，每次取5mL血液；血液当天使用预冷25度离心机，400 xg离心30分钟，分离保存上层血清。
5.分离淋巴细胞：在15mL的离心管中先加入3mL细胞分离液，然后缓慢加入3mL血液。加入血液时小心缓慢以防止血液和分离液混匀。之后离心机预冷至25度，400 xg离心30分钟后，观察离心管中血液分离情况，用200ul移液器小心吸取出中间棉状上层免疫细胞至新的15ml离心管中，上层血清保存在新的离心管中，-80度保存。每管加入室温放置的10mL PBS缓冲液，25度，400 xg离心20分钟。去除上清液，每管加入室温放置的5mL PBS缓冲液，25度，400 xg离心20分钟。使用血球计数板计算细胞数目。去除上清液，根据细胞数目使用RNAiso Plus溶解分离得到的淋巴细胞得到107/mL溶解液，-80度保存。
免疫技巧：
1.羊驼的选择是免疫实验效果的关键。选择健康强壮、精神状态良好、体型适中的羊驼，挑选的羊驼毛色光亮，无受伤不适症状可以极大增强免疫的效果。挑选好动物，先预养1周左右以淘汰有些不合格的动物，使后期的实验能顺利进行。
2.淋巴细胞的分离：及时的细胞分离可以有效阻止血液采集后的溶血以及达到最好的分离效果。
3.免疫周期的选择可以影响免疫效果，根据经验，1-2周免疫间隔可以使羊驼对大部分抗原有良好的免疫反应。
