十四歲嫁給大將軍楊忠之嫡長子楊堅。同年父親政鬥失敗被殺，家道中衰，丈夫亦遭權臣猜忌。獨孤伽羅保持低調謙恭作風，以期為夫消禍；周隋交替之際，親自勸勉楊堅定下立隋大計；之後拜為隋王妃、隋王后；隋朝開國乃為皇后。
獨孤皇后深度參與朝政，終身對隋文帝保持了強烈影響力，於開皇之治功不可沒，宮中並尊帝后為“二聖”。晚年主導罷黜宰相、廢易太子引發史學界爭議評價。隋文帝和皇后夫妻恩愛，“誓無異生之子”，共誕育有十個兒女。
隋開皇元年二月十四日，楊堅即皇帝位，建立隋朝，三天後即冊獨孤伽羅為皇后，從此夫妻嘔心瀝血為隋帝國的強大發展傾注了畢生的精力心智與心血，獨孤皇后也是中國歷史上罕見的對君主終生保持有強烈影響力的后妃。獨孤皇后通達書史，聰明過人。每次隋文帝上朝，她必與之同輦而行，至殿閣而止，派宦官跟隨而進溝通聯絡，“政有所失，隨則匡正，多有弘益”。待到文帝下朝，她早已在等候，夫妻“相顧欣然”一起回宮，同起同居形影不離。
在平常生活中，她一有閒暇便手不釋卷，學問不凡。隋文帝對這位愛妻是既寵愛又信服，幾乎是言聽計從，宮中同尊帝后為“二聖” 。所以，開皇年間的政治決策，很難分得清哪些是隋文帝的主意，哪些是獨孤皇后的的主意，而她的政治影響力也不僅限於影響隋文帝而已。高熲父親原來是獨孤信家的賓客，在獨孤家落難時，高家依然和獨孤皇后保持了親密的聯繫，高熲的才幹和品德都很得獨孤皇后賞識，故大力推薦給隋文帝。
而高熲位居首輔十餘年，經歷多次政治風浪，始終履險如夷、不動如山，一個最重要的原因就是他有獨孤皇后這一堅強靠山，以至隋文帝把他當家人看待。高熲地位的穩固，對隋朝具有重大的意義。換言之，高熲能夠在複雜的政治局面下最大程度地施展抱負、發揮才幹，固然有賴於他強大的個人能力，但是，獨孤皇后在宮中的支持與協助，應當也是重要因素。
在愛妻獨孤伽羅的輔佐和支持下，隋文帝迅速穩定了政局，領導著以高熲為首的能臣干將們開始了一系列大刀闊斧影響深遠的全面改革。他首先恢復漢制，建立起以漢文化為主導的意識形態理念；北破突厥，重新建立起以中原王朝為核心的東亞國際政治新秩序；南平陳朝，統一了分裂將近四百年的中華大地，並且使政治上長期分裂導致經濟、文化分裂的南北方初步開始融合；改革官制，正式確立分工明確的以三省六部為主體的中央官僚體系；
開創科舉制度，開始了打破世家門閥壟斷政治、文化資源第一步；修訂律法，廢除大量酷刑，制定出影響之後整個中國封建社會法制建設的《開皇律》，首創死刑三奏而決制度；休養生息，減輕農民負擔，文帝時期朝野豐足，隋朝國富程度歷代矚目
隋文帝完成的這一系列定萬世之基、成富國強兵的宏大偉業，在職官、禮法、經濟、文化、軍事、公共工程等各個方面都有突出表現，深遠地影響了之後的唐朝以及未來一千多年封建王朝的發展，史稱“開皇之治”，獨孤皇后對此功不可沒。
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