吳毅將,原名吳彩南,祖籍廣東中山,1967年6月22日出生於香港。1982年吳毅將畢業於香港亞洲電視戲劇訓練班。1986年吳毅將參演由劉松仁、陳復生等主演的電視迷你劇集《九月鷹飛》,飾演呂迪。1990年吳毅將加盟無線電視臺;參演林俊賢、莫少聰、王祖賢等主演的電影《無名家族》。
1993年吳毅將與任達華、關詠荷、莊靜宜等主演韋家輝監製的電視劇《暴雨燃燒》,飾演正義公安。之後又與萬綺雯、呂頌賢等主演電視劇《槍神》,飾演方正。1994年吳毅將先是在《滅門慘案之借種》中扮演一個性無能的退役軍人;接著在《弱殺》中扮演強姦智障少女的變態社工。隨後,又與郭秀雲、鄭爽、湯鎮宗等主演動作片《天網行動》,飾演林嘯;最後又參演了甄子丹、蔡曉儀等主演的電視劇《洪熙官》