1、直腸指診檢查：直腸指診檢查是主要的前列腺癌的診斷方法。由於前列腺緊貼在直腸的前面，因此，通過直腸指診可以摸到前列腺的大小、質地等狀況。正常的前列腺腺體大小約為4釐米×3釐米左右，質地柔軟，表面光滑無結節，兩側葉對稱。當患者有前列腺增生時，醫生通過直腸指診可以發現其前列腺腺體的變化(這時前列腺的體積會增大，但質地並不會很硬)，對前列腺癌的診斷十分重要。如果患者患有前列腺癌，醫生通過直腸指診可以摸到前列腺表面突起的腫瘤結節(如果腫瘤的體積較大，整個前列腺的質地都會變得很堅硬，像一塊石頭一樣)。
2、血清前列腺特異性抗原測定：前列腺特異性抗原是目前主要的前列腺癌的診斷方法。雖然在正常人的血液中也能檢查出前列腺特異性抗原，但是當血清前列腺特異性抗原升高到一定數值時，就提示患者的前列腺內存在癌細胞。血清酸性磷酸酶升高與前列腺癌轉移有關，但缺乏特異性。近年用放射免疫測定可提高其特異性。前列腺酸性磷酸酶單克隆抗體，前列腺抗原測定有待提高其特異性。C期前列腺癌20%～70%有酸性磷酸酶升高，有淋巴結轉移亦升高，如果持續升高則肯定有骨轉移。血清酸性磷酸酶，前列腺酸性磷酸酶升高者在手術後下降，是預後較好的象徵。在包膜內的前列腺癌酸性磷酸酶由前列腺細胞分泌，經前列腺導管排洩，前列腺癌時，癌細胞產生的酸性磷酸酶無導管排出或導管被癌病變梗阻，酶吸收入血循環，以至酸性磷酸酶升高。
一項研究發現，在經血清前列腺特異性抗原測定並且最終被確認為患有前列腺癌的473例患者中，有40%的患者是經直腸指診檢查沒有被發現的。目前，由於血清前列腺特異性抗原測定在臨床上的普遍應用，使前列腺癌的診斷時間平均提早了5～8年，這就為挽救前列腺癌患者的生命提供了更多的時間和機會。
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